多组分免疫亲和柱净化-高效液相色谱串联质谱法同步测定植物油中7种真菌毒素.pdf

中国油料作物学报 2016，38(5)：658—665 Chinese ofOil Sciences JournalCrop 多组分免疫亲和柱净化一高效液相色谱 串联质谱法同步测定植物油中7种真菌毒素 朱建国1’3’4…，李培武1’2’3’4’5+，张奇1’2’3…，张文1’3’4”， 张兆威1’3’4，杨青青1’3’4，王秀嫔1’3’5，王素君1，5 3．农业部生物毒素检测重点实验室，湖北武汉，430062；4．农业部油料产品质量安全风险评估实验室，湖北武汉，430062； 5．农业部油料及制品质量监督检验测试中心，湖北武汉，430062) 摘要：为提高植物油中真菌毒素的检测效率，研制免疫亲和柱，建立检测方法。以纯化的抗黄曲霉毒素(Agl， 体为特异性抓捕元件，通过研究比较3种载体材料和2种抗体偶联方法，成功制备出以CNBr—activatedCrystarose 4B作为固相载体材料的真菌毒素多组分免疫亲和柱。同时研究比较了提取溶剂、提取方式和上样缓冲液等条件， 并结合高效液相色谱串联质谱技术(HPLC—MS／MS)，建立了植物油中7种真菌毒素的同步免疫亲和净化—— HPLC—MS／MS检测方法。结果表明，该方法对7种真菌毒素的检测线性范围宽，线性回归方程相关系数(R2)均 菌毒素的检出限为0．10—0．50恤g／kg；添加回收实验中，低、中、高三个不同加标水平下的平均回收率为80．22％一 106．10％，相对标准偏差为1．05％～6．56％。该方法操作简便、净化彻底、回收率高、有机溶剂消耗量少，为食用植 物油中真菌毒素多组分同步确证性检测提供了一种高效、准确、灵敏的技术。 关键词：真菌毒素；多组分免疫亲和柱；高效液相色谱串联质谱；同步检测；植物油 中图分类号：TS201．6文献标识码：A 文章编号：1007—9084(2016)05—0658—08 Simultaneousdeterminationof7 in oil majormycotoxinsvegetableby HPLC—MS／MSwith column multi—componentimmunoaffimty ·ZHU Pei—WUl，2，3，4，5+．ZHANG4‘．ZHANGWenl，3，4一， Jian—gu01，3，4一，LI Qil，2，3t ZHANG Zhao—weil，3…，YANG Qing—qin91，3…，WANGXiu—pinl3…，WANGSu—junl，5 ResearchInstituteChinese (1．Oil of of Sciences，Wuhan430062，China； Crops AcademyAgricultural and Genetic Oil 2．KeyLaboratoryofBiology Improvementof Crops，MinistryofAgriculture，Wuhan430062，China； Detection Laboratoryof for 430062，China； 3．Key Mycotoxins，MinistryofAgriculture，Wuhan RiskAssessmentOilseeds 4．Laboratoryof for