专题五 血红蛋白的分离和提取.ppt
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专题5-3《血红蛋白的提取和分离》.ppt
3、凝胶色谱法分离蛋白质的原理 （四）纯度鉴定 * * * 教学目标 教学重点 教学难点 理解色谱法、电泳法等分离大分子的基本原理 了解缓冲液的组成及其作用 血红蛋白的提取和分离操作 凝胶色谱法的原理 电泳法分离大分子的原理 问题1： 蛋白质的分离的原理是什么？ 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。 问题2： 蛋白质的分离的方法？ 1、凝胶色谱法（分配色谱法） 2、凝胶电泳法 一、基础知识： ㈠ 凝胶色谱法（分配色谱法）： 1、凝胶： 2、分离依据：
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专题5课题3血红蛋白提取分离1详解.ppt
2003年4月14日宣布人类基因组序列图完成 这标志着进入了后基因组时代。 人类基因组：指DNA分子所携带的全部 遗传信息。 蛋白质组：生物个体表达的蛋白质分子的总和。主要是对蛋白质功能的研究 蛋白质分离的原理： 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 一、基础知识 （一） 凝胶色谱法 2.凝胶： 大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。 根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶，来进行分离。
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专题5_课题3__血红蛋白的提取和分离导学案2.doc
课题3 血红蛋白的提取和分离导学案
[导学诱思]
1．凝胶色谱法
凝胶色谱法也称做 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由 构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质 进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ；而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得
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专题5-3《血红蛋白的提取和分离》分解.ppt
3、凝胶色谱法分离蛋白质的原理 （四）纯度鉴定 * * * 教学目标 教学重点 教学难点 理解色谱法、电泳法等分离大分子的基本原理 了解缓冲液的组成及其作用 血红蛋白的提取和分离操作 凝胶色谱法的原理 电泳法分离大分子的原理 问题1： 蛋白质的分离的原理是什么？ 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。 问题2： 蛋白质的分离的方法？ 1、凝胶色谱法（分配色谱法） 2、凝胶电泳法 一、基础知识： ㈠ 凝胶色谱法（分配色谱法）： 1、凝胶： 2、分离依据：
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专题5_3_血红蛋白的提取和分离(gkk)精讲.ppt
专题5 课题3
体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解凝胶色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。
1、主要概念：①凝胶色谱法 ②电泳法 ③缓冲溶液 ④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。
2、主要原理：①凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②电泳法分离样品的原理 ③缓冲溶液的组成和作用机理
3、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法
4、课题难点：①样品的预处理 ②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
本课题学习目标
血红蛋白
两个α—肽链
两个β—肽链
四个亚铁红素基团
思考与讨论
血液有哪些成分？
血红蛋白的特点：
1.分离生物大分子的基本思路：
选用一定的物理或
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专题53血红蛋白的提取和分离精讲.ppt
一、基础知识： 1. 凝胶色谱 法的原理 2.缓冲液 3.电泳 二、实验操作——蛋白质的提取和分离 样品处理、粗分离、 纯化、纯度鉴定 样品处理 粗分离 纯化 （凝胶色谱操作） 纯度鉴定 1.洗涤红细胞时，为何次数不能过少？ 答：无法除去血浆代白。 2.洗涤红细胞时，为何离心速度不能过高，时间不能过长？ 答：会使白细胞等一同沉淀。 3.用沸水浴加热，是干燥的凝胶颗粒在洗涤液中膨胀有什么好处？ 答：节约时间；除去颗粒中可能有的微生物；排除空气。 4.向色谱柱中装填凝胶颗粒
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【选修1】专题5课题3血红蛋白的提取和分离.ppt
洗脱和收集 小心加入物质的量浓度为20mmol／L的磷酸缓冲液(pH为7.0)到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱 待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5ml一试管，连续收集。（在分离过程中，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功） 血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 你能描述
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专题5-3《血红蛋白的提取和分离》概要.ppt
3、凝胶色谱法分离蛋白质的原理 （四）纯度鉴定 * * * 教学目标 教学重点 教学难点 理解色谱法、电泳法等分离大分子的基本原理 了解缓冲液的组成及其作用 血红蛋白的提取和分离操作 凝胶色谱法的原理 电泳法分离大分子的原理 问题1： 蛋白质的分离的原理是什么？ 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。 问题2： 蛋白质的分离的方法？ 1、凝胶色谱法（分配色谱法） 2、凝胶电泳法 一、基础知识： ㈠ 凝胶色谱法（分配色谱法）： 1、凝胶： 2、分离依据：
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专题5-课题3-血红蛋白的提取和分离-课件.ppt
血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 讨论： 3、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？ 实验操作 （二）凝胶色谱操作 课题 3 血红蛋白的提取和分离 蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质的研究与
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专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离.ppt
水平测试 1．用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是( ) A．相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质 B．相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质 C．相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质 D．二者根本无法比较 金品质?高追求 我们让你更放心 ！ ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 金品质?高追求 我们让你更放心！ 返回 ◆生物?选修1(生物技术实践
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专题五课题三 血红蛋白的提取和分离（共36张PPT）.ppt
课题3 血红蛋白的提取和分离 用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质 ( D ) A．路程较长，移动速度较慢 B．路程较长，移动速度较快 C．路程较短，移动速度较慢 D．路程较短，移动速度较快 相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个B 选用红细胞作分离蛋白质的实验材料，下列是其优点的是 ( ABC )多 A．血红蛋白是有色蛋白 B．红细胞无细胞核 C．红细胞蛋白质含量高 D．红细胞DNA含量高 1、样品处理 （1）、红细胞的洗涤： （2）、血红蛋白的释放： （3）、分离血红蛋白溶液： 分离血红蛋白溶液
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专题5 课题3血红蛋白的提取和分离a.ppt
血红蛋白的提取和分离;基 础 知 识;基 础 知 识;;基 础 知 识;基 础 知 识;;在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是磷酸缓冲液，目的是利用缓冲液模拟细胞内的PH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和材料的科学研究（活性）;基 础 知 识;基 础 知 识;基 础 知 识;基 础 知 识;蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带静电荷的多少以及分子的大小等因素;基 础 知 识;如何测定蛋白质的分子量？
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@血红蛋白的提取与分离.ppt
①固定：将色谱柱处置固定在支架上 ②装填： 将（ ）一次性的缓慢倒入（ ）内，装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶填装均匀。 （3）凝胶色谱柱的装填方法 凝胶悬浮液 色谱柱 注意：凝胶装填时尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。装填凝胶柱时不能有气泡存在： 因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。 ③洗涤平衡 装填完毕后，立即用缓冲液洗脱瓶，在( )高的操作压下，用300ml的20mmol/l的磷酸缓冲液（pH为7.0）充分（ ）12小时。 洗涤平衡 注意液
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3血红蛋白的提取和分离终稿.ppt
2.凝胶色谱操作 凝胶色谱柱的制作 凝胶色谱柱的装填 样品的加入和洗脱 3.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 高考链接 1.2009.山东 细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果。下列属于奢侈基因的是（ ） A.血红蛋白基因 B.ATP合成酶基因 C.DNA解旋酶基因 D.核糖体蛋白基因 A 解析： 题干中给予“细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果”，根据题干可知，找出分化的细胞中特殊成分的基因即可，四个选项中BCD是所有活细胞中都具体的基因，而A.血红蛋白基因是分化后的红细胞才表达的基因。 * 新课导入 下面请看
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血红蛋白的提取和分离经典.ppt
2、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是A相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D二者根本无法比较第81页,共93页，2024年2月25日，星期天3、使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于A电荷的多少B分子的大小C肽链的多少D分子形状的差异4、在采血容器中加入柠檬酸钠的目的是A调节pHB维持红细胞的能量供应C防止微生物生长D防止血液凝固第82页,共93页，2024年2月25日，星期天6、记住样品处理中的血红蛋白溶