不同转染试剂对慢病毒包装及包装后病毒感染豚鼠成纤维细胞效率的.PDF

Heilongjiang Animal Science 34 and Veterinary Medicine № 10 2015 不同转染试剂对慢病毒包装及包装后 病毒感染豚鼠成纤维细胞效率的影响* 1 1 1，2 3 ， ， ， 何 何 吴 邵 承文 玉龙 月红 风慧 (1． ， 750021 ;2． 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 银川 浙江理工大学 ， 310018 ;3． ， 010070) 生命科学学院 杭州 内蒙古阜丰生物科技有限公司 呼和浩特 中图分类号:Q25 文献标识码:A 文章编号:1004 － 7034 (2015)10 － 0034 － 06 : ; ; ; ; 关键词 基因转染 慢病毒 绿色荧光蛋白 豚鼠 成纤维细胞 : ， 摘 要 为了研究不同转染试剂对慢病毒载体包装效率及包装后病毒感染细胞的能力 试验利用磷酸 、 2000 、 LTX QuickShuttle － 293 (Green Fluorescent Protein ， 钙 脂质体 脂质体 和 转染编码绿色荧光蛋白 GFP) 293T ， ， 基因的重组慢病毒载体进入 细胞包装病毒 包装的病毒感染豚鼠成纤维细胞 通过流式细 ， MTT 4 。 胞仪检测转染试剂的转染效率和病毒感染效率 同时利用 法检测了 种转染试剂的细胞毒性 : 、 ， 结果表明 磷酸钙在转染效率 转染后细胞活力及包装后病毒对豚鼠成纤维细胞的感染效率都最低 (54． 8 ± 2． 9)% 、(26． 7 ± 6． 0)% (7． 6 ± 1． 1)% ; 2000 LTX 293T 分别为 和 脂质体 和脂质体 对 细胞转 (P ＞ 0． 05)， 脂质体LTX 转染后细胞活力显著高于脂质体2000 (P ＜ 0． 05)， 脂 染效率差异不显著 但 即 LTX 2000 。 QuickShuttle － 293 、 质体 的细胞毒性显著低于脂质体 而 法转染后的转染效率 转染后细胞 活力和其包装后的病毒对靶细胞的感染率分别为(95． 5 ± 1． 8)% 、(88． 5 ± 5． 7)