GB/T 9695.6-1988肉制品　胭脂红着色剂测定.pdf

中华人民共和 国国家标准 UDC 637.51/.52 :543.06 肉制品 胭脂红着色剂测定 GB 9695.6一 8 Meatproducts-Methodfordetermination ofartificialcolourponceau一4R 1主题内容与适用范围 本标准规定了肉制品中胭脂红着色剂的测定方法。 本标准适用于仅含胭脂红着色剂的肉制品中胭脂红的测定。 2 引用标准 GB9695.19 肉与肉制品 取样方法 3 原理 试样脱脂后用碱性溶液提取胭脂红色素，提取液沉淀蛋白质，用聚酞胺粉使胭脂红吸附和解吸而纯 化，用比色法测定。 4 试剂 除另有说明外。所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或相当纯度的水。 4.1聚酞胺粉 (尼龙6):200目。 4.2 硫酸 (GB625):1:10溶液。 4.3 柠檬酸 (HG 3一1108):20%溶液。 4.4钨酸钠 (HGB3172):10%溶液。 4.5 石油醚 (HG 3-1003):沸程60一90`C, 4.6海砂:化学纯，先用1:10盐酸溶液煮沸15min，用水洗至中性，再用5%氢氧化钠溶液煮沸15min, 用水洗至中性，于105℃干燥，贮于具塞瓶中，备用。 4.7 乙醇一氨溶液:取氨水1mL，加70%乙醇至IOomL, 4.8 氢氧化胺 (GB631):1:99溶液。 4.9 胭脂红标准溶液: 4.9.1胭脂红标准贮备液:称取胭脂红食用色素0.1009，用20%柠檬酸酸化至pH6的水定容至loom, 此溶液胭脂红含量为1mg.mL, 4.9.2胭脂红标准使用液:临用时吸取标准贮备液5.OmL，用20%柠檬酸酸化至pH6的水定容至50nli 此溶液胭脂红含I为0.1mgmL, 5 仪器和设备 5.1 实验室常规仪器和设备。 5.2 绞肉机:孔径不超过4mma 5.3 G,砂芯漏斗。 5.4 分光光度计。 中华人民共和国商业部1988-02-25批准 1989一03一01实施 GB 9695.6一二 试样 6.1 按GB9695.19取样。 6.2至少取有代表性的试样200g，于绞肉机中至少绞两次使其均质化并混匀，试样贮存期间必须防止 腐败和成分变化，尽快分析试样。 7 分析步骤 7.1 提取 称取试样5.0一10.0g置研钵中，加海砂少许，仔细研磨至粉末状，吹冷风使试样略为-F.燥，加人 石油醚50mL,搅拌，放置片刻，倾出石油醚，如此重复处理三次，除去脂肪，吹干。加人乙醇一氨 溶液提取胭脂红，通过砂芯漏斗抽滤提取液，反复多次，直至胭脂红全部提完，收集全部提取液于 250mL锥形瓶中。 7.2 沉淀蛋白质 在水浴上使提取液浓缩至lomL以下，依次加人1:10硫酸溶液1.OmL和10/0a钨酸钠溶液1mL混 匀，继续加热5min，沉淀蛋白质。取下，彻底冷却至室温，过滤，用少量水洗涤滤纸，滤液准确稀 释至50mL或100mL，备用。 7.8 纯化 吸取滤液25.OmL于100mL锥形瓶中，在水浴上加热到70C，加人聚酞胺粉0.5--1g，充分搅拌， 使胭脂红完全被吸附。将聚酞胺粉全部转人G3砂芯漏斗，缓慢地抽滤。用20%柠檬酸酸化至pH4的 70℃水分三次洗涤，每次20mL，再用70℃水多次洗涤至滤液为中性。以上洗涤过程要搅拌。用1:99氨 溶液分次解吸全部胭脂红色素，收集全部解吸液，于水浴上驱氨，准确稀释至25mL或50m1，备用。 同一试样进行两次测定，并做空白试验。 了.4 测定 分别吸取胭脂红标准使用液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL置50mL容量瓶中，稀释至刻度， 此时瓶中胭脂红浓度分别为。、4,8,12,16,2011g/mL，上述标准溶液用lcm比色杯，以标准 系列空白调节零点，在510nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。试液用1cm比色祠，以试剂空白调 节零点，