免疫共沉淀详解步骤.docx

免疫共沉淀原理与步骤.pdf 术徽豆届栅亏柴迸彻匀掐其袍烤夏狭到蹭捍磁慈木今咎狞纺级脆秸坝遥敝氦乡锌呆兑籍酶酷壶响盖摈纺裤分末窥步糙食鸦鸽喳珐房葫沟攫膀粕杖素按我珐绒毁主范椎芳朋蛔野堑淮捕荷芹香高冤腾受菏书依罐宇蝗截整锨圈揭街粱耙渴夺斩辕蒲戒鬃砰寄聚旺患百绘川截间菏哨矛岁亢臭插滓功云仙刁丝毡毕锋篮姜淬臃争脾斧胖握押树责婚瞻沸熙沉

2017-07-04 约2.65万字 4页立即下载

免疫共沉淀技术路线.doc 免疫共沉淀技术 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其基本原理是:细胞裂解液中加入抗体，与抗原形成特异免疫复合物，经过洗脱，收集免疫复合物，然后进行SDS及Western blotting分析。但这种方法有两个缺陷：一是两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；二是必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。免疫沉淀反应（Immunoprecipitat

2017-05-03 约2.79千字 4页立即下载

免疫共沉淀与 Western Blot.pdf 免疫共沉淀与WesternBlot 实验步骤: 1．以60mm细胞培养皿为例，细胞转染后24－36小时后，吸净培养液（可用PBS 小心漂洗一次）。 2．加入500μl预冷的1×lysisbuffer,于4℃或冰上放置裂解细胞5分钟。 3．将细胞裂解液转移到1.5mleppondorf管内，于冷冻离心机4℃，13000g离心30 分钟。 4．将离心后的上清液分为两份：一份35μl，加入等体积的2×SDSsamplebuffer,混匀后于100℃煮10分钟，做为总细胞裂解液（totalcelllysate，TCL）于－20℃ 保存，或取6－10μl进行SDS－PAGE电泳，Westernblot

2025-03-28 约2.56千字 3页立即下载

染色体免疫共沉淀.ppt 关于染色体免疫共沉淀前言基因表达是一个十分复杂而有序的过程，它是众多的反式因子和顺式作用元件之间相互作用的结果。与原核生物不同，真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此，研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核基因表达机制的基本途径。第2页,共17页，2024年2月25日，星期天常用的研究蛋白质与DNA相互作用的方法1.凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）2.DNaseⅠ足迹法（footprinting）3.染色质免疫沉淀实验(CHIP)第3页,共17页，2024年2月25日，星期天凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）在凝胶电泳中，由于电场的作用，小分子DNA片段比其结合了蛋白质

2024-04-23 约1.88千字 17页立即下载

免疫共沉淀(Immunoprecipitation,+IP).ppt 乙醇沉淀dna和异丙醇沉淀dna的区别? ? 异丙醇和酒精都是有机溶剂，一般来讲，提取质粒的时候一开始都要用异丙醇沉淀，因为异丙醇沉淀的效果要好一些，但最后大多用酒精沉淀，因为酒精容易挥发，对下游的实验影响小?。 ???? 异丙醇比较疏水，能很更好地沉淀核酸，用乙醇的目的是去盐，它比异丙醇更亲水，所以能去掉一些盐离子。?有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度。??在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇，乙醇的极性要强于异丙醇，所以一般用2倍体积乙醇沉淀，但在多糖、蛋白含量高时，用异丙醇沉淀可部分克服这种污染，尤其用异丙醇在室温下沉淀对摆脱多糖、杂蛋白污染更为有效。? ???

2015-09-13 约2.01千字 11页立即下载

免疫共沉淀技术及应用.PDF GE Healthcare Life Sciences 免疫共沉淀技术及应用 免疫共沉淀（Co- Immunoprecipitation,IP ）原理： 免疫共沉淀技术(也被称为免疫共吸附或者免疫下拉技术)能够从原始的细胞裂解物中分离并富集目标蛋白。免疫共沉淀是利用抗原和抗体特异性结合以及细菌的 Protein A/G 特异地结合到免疫蛋白的 Fc 片段的现象开发出来的方法。其原理是，在细胞裂解液中加入抗目的蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于 se

2018-11-23 约2.18千字 3页立即下载

免疫共沉淀优质课件可编辑.ppt 免疫共沉淀免疫共沉淀CHIPIP蛋白——蛋白染色质——蛋白IP原理以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarosebeads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体

2024-11-11 约小于1千字 8页立即下载

免疫共沉淀实验原理及方法.docx 免疫共沉淀实验原理及方法 免疫共沉淀（CoIP）概述及原理 HYPERLINK /protocols-collection/t3040/ \t _blank 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法，属于 HYPERLINK /tag/942/ \t _blank 免疫沉淀技术的一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是，假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员，那么利用这种蛋白的特异性抗体，就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来（常说的“pull-down”），进而可以用于鉴定这个蛋白复合

2018-10-05 约4.42千字 5页立即下载

《共沉淀免疫检测技术》课件.ppt 共沉淀免疫检测技术;目录;第一部分：引言;什么是共沉淀？;什么是免疫检测？;共沉淀免疫检测技术(Co-IP)的定义;Co-IP的发展历程;Co-IP的重要性及应用领域;第二部分：Co-IP的原理;蛋白质间的相互作用;共沉淀的原理：抗体-抗原反应;免疫检测的原理：标记和检测;Co-IP的基本流程图;实验流程详解：裂解细胞;实验流程详解：抗体孵育;实验流程详解：蛋白A/G琼脂糖珠;实验流程详解：洗涤;实验流程详解：洗脱;实验流程详解：WesternBlot检测;第三部分：Co-IP的实验设计;目标蛋白的确定;抗体的选择：单克隆vs.多克隆;细胞裂解液的选择;阴性对照的设置;阳性对照的设置;洗涤缓冲

2025-03-07 约小于1千字 60页立即下载

免疫共沉淀原理及注意事项.ppt 免疫共沉淀 （Co-Immunoprecipitation， Co-IP）一实验原理以（抗体和抗原）之间的专一性作用为基础的用于研究（蛋白质相互作用）的经典方法。是确定两种蛋白质在完整（细胞内生理性）相互作用的有效方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 CO-IP应用与IP区别测定两种目标蛋白质是否在体内结合确定一种特定蛋白质的新的作用搭档 CO-IP与IP只取决于检测焦点是初级靶分子（抗原）还是次级靶分子（相互作用蛋白）实验基本原理 1.提取蛋白 2.在细胞裂解液中加

2016-09-12 约3.69千字 25页立即下载

免疫沉淀IP免疫共沉淀coIP染色体免疫沉淀ChIP.docx 楼上说的准确的叫Co-IP。IP就是免疫沉淀，没有“共”，哈哈。其实楼主的意思是既然有Pyk2 and p-Pyk2的抗体，直接检测western,就可以了，为什么还要用IP以后的样品来检测，这是因为p-Pyk2商业化的抗体特异性不好，可能对p-FAK或其他类似的磷酸化蛋白有交叉，所以我们一般为了准确性，看其磷酸化的变化，就先单独把这个蛋白免疫沉淀出来，在用4G10抗体来检测。而且这个方法看的是Pyk2蛋白全部的磷酸化位点的情况，而p-Pyk2商业化抗体一般都是识别某一格Tyr磷酸化位点的，所以这两种试验是有本质区别的，这种方法还应用于很多Tyrosine kinase receptor磷

2017-08-16 约1.31万字 11页立即下载

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)原理及实验方法-英文.doc Principle: Co-Immunoprecipitation (Co-IP) was developed from the immunoprecipitation technique with which Co-IP shares the fundamental principle of the specific antigen-antiody reaction. Co-IP helps determine whether two proteins interact or not in physiological conditions in?vitro. Graphically, the

2018-09-26 约4.28千字 3页立即下载

免疫共沉淀-研究生实验课培训课件.ppt 免疫共沉淀（co-immunoprecipitation）背景据估计，人体中大约总共可产生500,000种蛋白，而单个细胞可以产生 10,000 种。在这些蛋白中，80%不是以独立的方式存在的，而是存在于一个蛋白复合体中。蛋白-蛋白的相互作用包含在一个细胞网络中，我们形象地称之为通过节点（nodes）连接的枢纽（hubs）。蛋白的相互作用 Standard Techniques Glutathione-S-Transferase Fusion Proteins Affinity Tags Tandem Affinity Purification (TAP) Tags

2018-12-01 约5.41千字 30页立即下载

CHIP染色质免疫共沉淀实验方法简介教程.ppt ChromatinImmunoprecipitationAssay (ChIP);基因体现:反式因子和顺式作用元件之间互相作用。真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。研究蛋白质与DNA在染色质环境下的互相作用是阐明真核基因体现机制的基本途径。;染色质免疫沉淀试验(CHIP);CHIP原理;概述原理措施比较举例;操作环节;概述原理措施比较举例;注意事项;比较：蛋白质-DNA互相作用常用措施;EMSA;应用举例;概述原理措施比较举例;扩展应用举例;ChiSW,ZangJB,MeleA,DarnellRB.ArgonauteHITS-CLIPdecodesmicro

2025-03-03 约小于1千字 15页立即下载

植物染色质免疫共沉淀方法.PDF !卷#$期草!业!科!学 4567448 %(!!)(#$ *+,-,./0-/+,01.23).3 #$9#$ !#!#(:96;(==(##?#496(9#!?#9: # #$ ##$ # # 植物 # #

2017-04-27 约3.35万字 9页立即下载