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RictormTORC2在小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞的表达调控研究的开题报告
一、研究背景和意义
干细胞是具有自我更新和分化能力的细胞,可分化为多种细胞类型,成为组织修复和再生的潜在来源。在干细胞定向分化为心肌细胞方面,Rictor作为TORC2的一个亚单位,通过调控Akt的磷酸化状态等信号传递通路,参与了心肌细胞的分化和增殖。然而,关于Rictor在小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞的表达调控研究还较少,需要进一步探讨。
本研究旨在探究Rictor在小鼠ES细胞体外定向分化为心肌细胞的表达调控机制,为发掘干细胞分化和心肌组织再生机制提供新思路和理论支持。
二、研究方法
1.小鼠ES细胞的培养和心肌细胞分化诱导方法:采用培养小鼠ES细胞的方式及周期酸酐/雷帕霉素诱导分化方式,诱导小鼠ES细胞向心肌细胞分化。
2.Rictor的上调和下调实验:采用RNA干扰和质粒过表达技术,构建Rictor的上调和下调模型,观察对小鼠ES细胞向心肌细胞的分化及细胞增殖的影响。
3.Westernblot和qPCR等技术分析:采用Westernblot、qPCR等技术,检测小鼠ES细胞向心肌细胞分化过程中Rictor的表达变化及其与Akt等信号通路的相关性。
三、预期结果
1.Rictor参与小鼠ES细胞向心肌细胞分化的过程,并通过调节Akt等信号通路对心肌细胞的增殖和分化发挥重要作用。
2.通过对Rictor上调和下调模型的构建,发现Rictor的上调可促进小鼠ES细胞向心肌细胞分化,而Rictor的下调可能抑制小鼠ES细胞向心肌细胞分化。
3.Rictor的表达水平与Akt等信号通路相关基因的表达变化密切相关。