2-3分解纤维素的微生物的分离.ppt

* 教学目标: 1、知道纤维素酶的种类及作用 2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维 素的微生物的实验方法 * 一、基础知识 1.纤维素 (1)化学组成： 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。 * （2）纤维素分布： 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物； 分布植物的根、茎、叶中；木材、作物秸秆 * 土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖，后再利用。 * 2.纤维素酶 纤维素酶是一种 ，一般认为它 即 ，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 一、基础知识 复合酶 C1酶(外切酶)、 和葡萄糖苷酶 CX酶(内切酶) * 在一支试管中添加纤维素酶， 另一支试管不添加纤维素酶； 〖思考1〗实验分析：P38的小实验是如何构成对照的？ 滤纸崩溃法 * 2、纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法______________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后， 红色复合物无法形成，出现以_____________ 为中心的________，可以通过___________________________ 来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 * 可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 * 练一练： 1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 * 2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌 * 二、实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别培养基 挑选菌落 什么样的环境取样? ① 培养的目的? ②选择培养基的特点? 挑选什么样的菌落? ①鉴别培养基的特点? ②如何鉴别? 根据：微生物对生存环境的要求，到相应环境中去找； 目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物； 刚果红染色法 * 挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－ 370C培养，可获得纯培养。 * 1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是__________ 【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题： 液体 没有添加琼脂 2、该培养基对微生物_____（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 ____________________________________________________________________________ 具有 以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖； * 若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。 3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？ 葡萄糖 纤维素粉 提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。 * 说明：分析“纤维素分解菌的选择培养基配方”可知，该配方中的酵母膏也能够提供少量的碳源，因此其他微生物也能在该培养基中生长繁殖。只不过，由于酵母膏的含量极少，因此，只有以纤维素为碳源的微生物才能大量繁殖。 * 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ * 思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？ 本实验流程与课题2的流程的区别如下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。 * 培养基组成 提供的主要营养物质 CMC-Na 5~10g 碳源 酵母膏 1g 碳源、氮源、