人鼻咽癌细胞系CNE-2中肿瘤干细胞样亚群细胞初步研究的开题报告.docx

人鼻咽癌细胞系CNE-2中肿瘤干细胞样亚群细胞初步研究的开题报告

开题报告

题目：人鼻咽癌细胞系CNE-2中肿瘤干细胞样亚群细胞初步研究

背景：

人鼻咽癌是一种常见的头颈肿瘤，具有高度恶性与糟糕的预后。目前，放疗、化疗等治疗手段虽然可以缓解症状，但肿瘤复发和转移的难题仍然困扰着临床医生。因此，为了有效治疗鼻咽癌，了解肿瘤的发生机制是非常必要的。

肿瘤干细胞（CSCs）指的是在肿瘤组织中标识出的具有自我更新和分化能力的一组细胞，其在肿瘤的发生和发展中起到了重要作用。目前，CSCs已经被证实与肿瘤的复发、耐药和转移等关键过程有着密切的关系。因此，对肿瘤干细胞的研究有助于加深我们对于肿瘤发生机制的理解，进而提高肿瘤的治疗效果。

研究目的：

鼻咽癌肿瘤组织中的肿瘤干细胞一直是研究的重要方向，但受样本限制，对人鼻咽癌肿瘤干细胞的研究进展较为缓慢。因此，本研究将以人鼻咽癌细胞系CNE-2为模型，初步探索该细胞系中的肿瘤干细胞样亚群细胞。

研究方法：

1.实验细胞系CNE-2的培养：

采用基本的细胞培养技术，以DMEM/F12培养基添加10％胎牛血清（FBS）为基础细胞培养液，保持细胞处于良好的生长状态。

2.CSCs的检测

利用流式细胞术（FACS）将CNE-2细胞株分选出CD133+和CD44+CD24-CD133+这两种肿瘤干细胞样亚群细胞，实时定量PCR检测CSCs标志基因（如Nanog,Oct4,Sox2等）的表达，验证肿瘤干细胞的存在。

3.CSCs的检测中的管球形成能力检测

利用同种的细胞，分选出CD133+和CD44+CD24-CD133-这两种肿瘤细胞亚群；将两种细胞在不同的温度，液体，固体和三种环境因素下进行培养；观察管球形成情况，验证肿瘤干细胞的管球形成能力。

预期结果：

通过本研究，我们将首次利用人鼻咽癌细胞系CNE-2为模型，初步探索该细胞系中的肿瘤干细胞样亚群细胞，并检测肿瘤干细胞标志基因的表达及管球形成能力等，为后续深入研究人鼻咽癌肿瘤干细胞提供基础数据和理论支持。同时，我们还将为临床治疗的个体化表征提供新的思路和方法。

参考文献：

1.LinS,SongL,ZhangH,etal.Theroleoftumor-associatedmacrophagesinthegrowthandprogressionofnasal/nasopharyngealcarcinoma[J].JournalofCancerResearchandClinicalOncology,2013,139(5):919-929.

2.KimD,NguyenNQ,LeeJK,etal.Mechanismsofresistancetoanti-angiogenicagentsandtheirpivotalrolesinmetastasis[J].CancerandMetastasisReviews,2018,37(1):85-89.