DB36T 885-2015 南方水稻黑条矮缩病毒RT-PCR检测技术规范　.pdf

ICS67.060

B22

备案号：48489-2016DB36

江西省地方标准

DB36/T885—2015

南方水稻黑条矮缩病毒RT-PCR检测技术规

范

RuleofRT-PCRDetectiononSouthernRiceBlack-streakedDwarfVirus

2015-12-21发布2016-03-15实施

江西省质量技术监督局发布

DB36/T885—2015

目次

前言II

1范围1

2术语和定义1

3样品采集1

4样品处理2

5总RNA提取2

6RT-PCR2

7琼脂糖凝胶电泳2

8凝胶成像分析2

附录A（资料性附录）南方水稻黑条矮缩病病原3

附录B（规范性附录）TRIzol法提取总RNA技术流程4

附录C（规范性附录）SRBSDV标准样品RT-PCR电泳图5

I

DB36/T885—2015

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由江西省农业厅提出并归口。

本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所、江西农业大学农学院。

本标准主要起草人：杨迎青、兰波、李湘民、崔汝强、孙晓棠、魏洪义、蒋军喜、陈洪凡、王广利、

熊艳。

II

DB36/T885—2015

南方水稻黑条矮缩病毒RT-PCR检测技术规范

1范围

本标准规定了南方水稻黑条矮缩病毒（Southernriceblack-streakeddwarfvirus,SRBSDV）的

样品采集、样品处理、总RNA提取、RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像分析。

本标准适用于水稻疑似病株及白背飞虱样品对SRBSDV的RT-PCR检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

2.1

引物primer

指一小段单链DNA或RNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延

伸的出发点而起作用的多核苷酸链。

2.2

退火温度annealingtemperature

为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。

2.3

反转录PCRreversetranscriptionPCR(RT-PCR)

指一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。

2.4

琼脂糖凝胶电泳agarosegelelectrophoresis

指用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。

3样品采集

3.1水稻疑似病株样品采集

田间将疑似病株连根拔起，用吸水纸包住根部，整株带回实验室，保存于4℃冰箱、备用