细菌感染的检查方法和防治原则.ppt

**第七章

细菌感染的诊断与防治原则细菌学诊断01---以检测致病菌及其抗原或代谢产物为目的血清学诊断02---以检测患者血清中特异性抗体为目的基因诊断03---以检测致病菌特异性DNA片段为目的细菌感染的实验室诊断主要包括：第一节细菌学诊断标本的采集原则：无菌采集严格无菌操作，避免标本被污染。标本收集于无菌容器中，容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或用一次性无菌容器，而不能用消毒剂处理。01如流脑病人取CSF、血液或出血瘀斑；伤寒病人在病程1～2周内取血液，2～3周时取粪便。不同疾病、不同时期取不同部位标本02取局部病变标本，不可使用消毒剂，必要时以无菌生理盐水冲洗，拭干后取材。尽可能取病变明显部位的材料取样部位粪标本：自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液的粪便一小匙。液体粪便则取絮状物，一般取1～3ml，直接装入粪便容器或保存液或运送培养基中送检。痰标本：采集标本前应用清水、冷开水漱口有假牙者应取下假牙。首先轻咳，咳出咽喉部的分泌物，弃去，再用力咳嗽，咳出肺部的痰液直接吐入无菌的容器中。若怀疑结核感染找抗酸杆菌，应收集24小时的痰液于清洁玻璃容器内。若怀疑放线菌感染，应让病人留取含有颗粒的痰液，实验室查到硫磺颗粒且弱抗酸，可以考虑放线菌感染。早期采集采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，且必须在抗菌药物使用前，否则这份标本在分离培养时要加入药物拮抗剂。一般标本采集后最好在2h内送检，大多细菌可4℃冷藏运送、特殊（如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌）需保温立即送检。01粪便标本中杂菌多，常置于甘油缓冲盐水保存液中。02尽快送检、冷藏运送注意安全烈性传染病或病因不明患者临床标本的采集时应做好防护工作。直接涂片染色镜检形态和染色性上有特征的致病菌，直接涂片镜检后有助于初步诊断。如：痰中查抗酸性杆菌，脓液中找G+葡萄串样球菌等。细菌学诊断方法12葡萄球菌霍乱弧菌结核分枝杆菌ABA.结核分枝杆菌培养的镜下形态(抗酸染色)B.结核分枝杆菌痰标本直接涂片(抗酸染色)1分离培养（isolationandcultivation）：2所有标本原则上均应作分离培养获得纯培养后进一步鉴定，根据不同要求选用不同培养基。3分离培养比直接涂片镜检阳性率高，但需时较久；大多细菌16～24h，结核杆菌需4～8w。4分离培养是微生物学诊断的金标准。分离培养

isolationandcultivation分离培养是微生物学诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术。（图为普通孵箱）厌氧箱厌氧袋3、生化试验各种细菌所具有的酶不完全相同，对营养物质的分解能力亦不一致，因而其代谢产物有别，藉此可对不同致病菌进行鉴别（如肠道杆菌）。糖发酵试验4、血清学试验：含特异抗体的免疫血清＋未知纯种细菌进行血清学实验，可确定致病菌的种和型。常见有玻片凝集试验。玻片凝集试验主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等。常用动物：小鼠、豚鼠、家兔接种途径：皮内、皮下、腹腔、肌肉、静脉、脑内等。0102035、动物试验：6、药物敏感试验测定标本中致病菌对药物的敏感程度。对指导临床用药及控制感染有重要意义。常用纸碟法和试管稀释法。第二节血清学诊断采用已知的细菌或其特异性抗原，检测患者血清或其他体液中有无相应特异性抗体及其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。在血清学诊断中，最好采取患者急性期和恢复期双份血清标本。1结果：以抗体效价明显高于正常人水平或患者恢复期抗体效价比急性期升高≥4倍方有意义。2常用有凝集实验、沉淀实验、补体结合实验、中和试验、ELISA等。3优点：快速、灵敏且不受抗生素等药物影响。4肥达试验玻片凝集实验DNA探针技术02PCR技术01DNA芯片技术03第三节分子生物学诊断细菌学诊断基本方法第四节细菌感染的特异性防治人工被动免疫抗毒素、丙球人工免疫人工主动免疫疫苗、类毒素自然主动免疫患病、隐性感染人工免疫：采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体，以增强宿主体的抗病能力。自然免疫自然被动免疫胎盘、初乳特异性免疫产生的方式一、人工主动免疫人为地将疫苗（vaccine）或类毒素接种于人体，使机体主动产生特异性免疫力的一种防治微生物感染的措施。疫苗---灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗、重组活载体疫苗、转基因植物疫苗和治疗性疫苗。类