《花椒组织培养快繁技术规程》（征求意见稿）.docx
ICS65.020.01CCSB30
41
河南省地方标准
DB41/TXXXX—XXXX
花椒组织培养快繁技术规程
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（征求意见稿）
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XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
河南省市场监督管理局发布
I
DB41/TXXXX—XXXX
目次
前言 II
1范围 1
2规范性引用文件 1
3术语和定义 1
4缩略语 1
5培养容器与接种器械的灭菌 2
6培养基的配制与灭菌 2
7外植体的处理 2
8芽诱导 2
9增殖培养 2
10生根培养 3
11炼苗与移栽 3
附录A（资料性）WPM培养基成分 4
附录B（资料性）MS营养液成分 5
II
DB41/TXXXX—XXXX
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由河南省林业局提出并归口。
本文件起草单位：河南省林业科学研究院。
本文件主要起草人：王文君、翟晓巧、任媛媛、王念、侯志华、何威、董玉山、王星斗。
DB41/TXXXX—XXXX
1
花椒组织培养快繁技术规程
1范围
本文件规定了花椒组织培养快繁的培养容器与接种器械的灭菌、培养基的配制与灭菌、外植体的处理、芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗与移栽等技术。
本文件适用于花椒的组织培养快繁育苗。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
LY/T1882林木组织培养育苗技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
花椒
芸香科花椒属花椒（ZanthoxylumbungeanumMaxim.）3.2
外植体
从植物活体上切取下来用于建立组织培养体系的材料，包括完整植株、器官或组织。3.3
组织培养
在无菌条件下，将外植体接种在装有人工配制培养基的培养瓶中。将培养瓶放置于人工控制光照和温度的组织培养室内，使之生长、分化或发育成完整植株的培养技术。
3.4
芽诱导
将培养材料在诱导培养基中进行培养，诱导分化出不定芽的过程。
3.5
增殖培养
把诱导产生的芽转移到增殖培养基进一步扩大培养的过程。
3.6
生根培养
将芽转移到生根培养基中诱导生根从而形成完整植株的过程。
3.7炼苗
DB41/TXXXX—XXXX
2
指将初步生长良好的组培生根苗移植到接近自然的环境条件中，通过调整光照、温度、湿度等措施，逐步减少人工营养供给，促使其根系发育、增强抗逆性和生长能力，以便定植后能够迅速适应自然环境。这是组培苗由组织培养环境逐渐适应自然环境的驯化过程，为后续的移栽或种植奠定基础。
3.8移栽
又称移植，指把在苗床中的幼苗移裁到田间生长，
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
6-BA：六苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine）
NAA：萘乙酸（NaphthaleneAceticAcid）
TDZ：噻苯隆（Thidiazuron）
IBA：吲哚丁酸（IndolebutyricAcid）
WPM：WPM基本培养基（WoodyPlantMedium）
MS：MS培养基（MSculturemedium）
5培养容器与接种器械的灭菌
将培养容器瓶、手术剪、镊子、手术刀等接种器械用报纸或灭菌袋包好，于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min。
6培养基的配制与灭菌
以WPM+20g/L白砂糖+5.0g/L琼脂为基本培养基进行培养基配置（WPM培养基成分表见附录A）。培养基的灭菌按照LY/T1882的要求，将配置好的培养基分装至组培瓶中，于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min，之后取出备用。
7外植体的处理
7.1外植体选择
选生长健康的花椒叶片的叶柄为外植体。
7.2无菌水的准备
取一定体积的蒸馏水于三角瓶等容器中，于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min，之后取出备用。
7.3外植体处理
取花椒叶片的叶柄，用清水清洗后，75%酒精浸泡5min，再用0.1%氯化汞消毒3min～5min，无