RP-HPLC法检测大鼠血浆盐酸川芎嗪注射液的方法学研究.pdf

第 2 3 卷第 3期 湖南中医杂志 Vol123　No13 ·94 · 2 007 年 5 月 HUNAN JOURNAL OF TRAD ITIONAL CH NI E SE MED IC NI E May　2007　　　　　　 RP - HPLC法检测大鼠血浆盐酸川芎嗪注射液的方法学研究 中南大学湘雅二医院 (4 10 011) 　刘建宇 ,姚金城 ① ,赵绪元 ② 关键词 　川芎嗪 ;药代 动力学 ;方法学 ;色谱法 ,高压液相 ;大鼠 　　川芎 嗪 (L igu strazine, tetram ethylp yrazine, TMP ) 是从中 药材川芎中提取的生物碱 ,是川芎的有 效成分 ,其化 学结构 为四甲基吡嗪 , 主要有 盐酸川芎嗪 ( TM PH ) 和磷酸 川芎嗪 ( ) [ 1 TMPP 两种 。临床及实验研究证 明 ,川芎 嗪具有 活血化 瘀 、扩张血管 、增加冠脉及脑血流 、改善微循环 、抗血 小板凝 集与血栓形成 、兴奋呼吸中枢等作 用 。心血 管药理学及 电 [2 生理研究提示川芎嗪类似于 “钙离子拮抗剂 ” 。为研究盐 酸川芎嗪注射液在大 鼠的体 内过程及药物代 谢动 力学 ,本 试验特建立了用高效液相色谱法对大 鼠血浆 中盐酸 川芎嗪 检测的方法 ,现介绍如 下 。 a - 对照品 ; b - 注射液 ; c - 空白样品 1　实验材料 图 1　紫外吸收光谱图 仪器 :岛津 LC - 10A 高效液相色谱仪 (岛津公 司 ) SPD 嗪标准溶液及空白血浆加川芎 嗪标准 溶液 , 分别绘制 H PL C - 10A vp 紫外 检 测器 , Sh mi adazu class - vp 6. 2 工 作站 , 色谱图 (见图 2) 。 53W B 型紫外分光光度 计 , TD Z4 - W S型台式低速 离心机 、 结果显示盐酸川芎嗪与血液内源物质色谱峰分离 良好 , ( 并无重合峰等干扰峰出现 ,盐酸川芎嗪保留时间为 6. 92m in 。 TG16 - W S型台式高速离心机 塞特湘仪离心机仪器有限公 司 ) 。试剂 :盐酸川芎 嗪对 照品 (中国药品生物制 品检 定所 2. 5　标准曲线的制备 　精密量取 空白血浆 200μl, 分别加 提供 ,批号 : 1054 - 2 00304 ) ,盐酸川芎嗪注射 液 (武汉远大 入不同浓度的川芎嗪标准溶液 , 配制 成为 0. 4 6、0. 93、1. 86、 制药 , 4 0m g/ 2m l,批 号 : 0605 16) , 乙腈 、甲醇为色谱醇 , 水为 3. 72、7. 44、14. 88、29. 76ug/m l川芎嗪 的生物样品 ,按 前述 双蒸水 ,其余试剂均为分析 纯 。 “生物样品的预处理方法 ”进 行处理和测 定 ,记录色谱图及 2　方法和结果 川芎嗪的峰面积 Y, 以川芎嗪浓度 C ( ug/m l)对 Y 进行线性 2. 1　标准溶液的配制 　精 密称取 川芎嗪对 照品 18. 6mg于 回归 ,得 川芎嗪在大鼠血浆 中的标 准曲线 ,回归方程 为 Y = 3 100m l的容量瓶中 ,加双蒸水充分溶解后 ,定容稀释至刻度 , 2. 164