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涂膜抗病毒活性和抗菌性测定法
警示——使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验,本文件并未指出所有可能的安全问题,
使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。
1范围
本文件描述了一种通过比较试样和对照样中的存活病毒数量和/或活菌数来测定涂膜抗病毒活性和
/或抗菌性的测试方法。
本文件适用于施涂于墙面、家具、玩具、车辆内饰件、电子电器、电梯、五金件等表面,具有抗病
毒和/或抗菌功能的涂膜。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T1727漆膜一般制备法
GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法
GB/T8170—2008数值修约规则与极限数值的表示和判定
GB/T9278涂料试样状态调节和试验的温湿度
GB/T19258.1—2022杀菌用紫外辐射源第1部分:低气压汞蒸气放电灯
GB19489实验室生物安全通用要求
GB41918—2022生物安全柜
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
抗菌antibacterial
采用化学或物理方法杀灭细菌或妨碍细菌生长繁殖及其活性的过程。
抗病毒antiviral
通过化学或物理方法使病毒失去活性的过程。
4抗病毒活性试验
概述
将病毒接种于制备好的样品表面,经接触一定的时间后,通过比较试样和对照样中的存活病毒数量
计算抗病毒率,以抗病毒率来表征抗病毒活性。
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实验室要求
实验室应满足GB19489要求,试验应在BSL-2或以上安全级别的生物安全实验室操作,并确保实验
室生物安全。
设备和材料
4.3.1高压蒸汽灭菌器:温度能保持(121±2)℃,压力能保持(103±5)kPa。
4.3.2干热灭菌箱:温度能保持160 ℃~180 ℃,波动不超过±2 ℃。
4.3.3天平:精度0.1 g;精度0.1 mg。
4.3.4水浴箱:温度能保持(37±1)℃、(50±1)℃、(56±1)℃和(60±1)℃。
4.3.5二氧化碳培养箱:能保持温度(34±1)℃、(37±1)℃和5%二氧化碳浓度。
4.3.6冰箱:温度能保持2 ℃~10 ℃、(-20±2)℃和(-80±2)℃。
4.3.7过滤器:孔径0.22 μm。
4.3.8倒置显微镜。
4.3.9pH计:精度±0.2。
4.3.10液氮罐。
4.3.11培养箱:温度能保持(25±1)℃。
4.3.12细胞培养瓶。
4.3.13细胞培养板:6孔板或96孔板。
4.3.14离心机:能保持温度(4±2)℃和离心力10000 g。
4.3.15微生物实验室用的涡旋器、镊子、量筒、烧瓶、试管、烧杯、离心管等。
4.3.16覆盖膜:聚乙烯薄膜,标准尺寸为(40±2)mm×(40±2)mm、厚度为(0.05~0.10)mm。
试剂和培养基
4.4.1一般规定
除另有规定外,在试验中仅使用化学纯及以上纯度的试剂和符合GB/T6682—2008中三级水要求的
蒸馏水或去离子水。
使用的试剂和材料满足生物学实验室要求,即对病毒和宿主细胞无毒无害。实验室可以选用按照下
列配方制备试剂,也可以按照所操作的病毒及宿主的情况自行购买适用的等效商品化试剂。
4.4.2无菌水
将水按10 毫升/支分装到无色玻璃试管中,放入高压蒸汽灭菌器(4.3.1)中在(121±2)℃条件
下灭菌15 min后备用。
4.4.3最低基础培养基(EMEM)
配方见附录A。使用商品培养基时,若有任何成分缺失,按配方表(见表A.1)添加。
4.4.47.5%碳酸氢钠溶液
将75g碳酸氢钠溶于1000mL水中配成7.5%(质量分数)碳酸氢钠溶液,使用0.22 μm过滤器(4.3.7)
过滤除菌。制备后如不立即使用,置于5 ℃~10 ℃条件下保藏。保存期不超过30 d。
4.4.5甲醛溶液