结肠癌细胞EGFR、IGFR-1β信号通路的活化状态与吉非替尼敏感性的关系.ppt

结肠癌细胞EGFR、IGFR-1β信号通路的活化状态与吉非替尼敏感性的关系 杨 黎 梁后杰 第三军医大学西南医院肿瘤科 * 1 2 3 4 结肠癌细胞EGFR信号通路蛋白表达、活性与吉非替尼敏感性的关系 AG1024对结肠癌细胞EGFR和IGFR-1β信号通路活化状态的影响 吉非替尼作用下敏感性不同的结肠癌细胞的细胞周期 和凋亡情况 IGFR-1β信号通路的蛋白表达、活性与吉非替尼敏感性的关系 研究目标 Lovo细胞－对吉非替尼最为敏感 HT29细胞－中度敏感 HCT116细胞－耐受型 敏感性不同的结肠癌细胞EGFR信号通路的活化状态 结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性 细胞生长对EGFR的依赖性 EGFR和下游信号通路的伴随性 敏感性减低 结肠癌细胞EGFR信号通路的活化状态与吉非替尼敏感性的关系 流式细胞仪检测吉非替尼作用下敏感性不同的结肠癌细胞的细胞周期分布 Lovo：细胞周期G1期阻滞明显 HT29：轻度被阻滞 HCT116：阻滞不明显 吉非替尼可通过调控细胞周期引起结肠癌细胞的生长抑制 流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI双标法检测吉非替尼作用下敏感性不同的结肠癌细胞的凋亡 Lovo：细胞凋亡率明显增加 HT29：轻度增加 HCT116：增加不明显 吉非替尼可通过诱导凋亡引起结肠癌细胞的生长抑制 结肠癌细胞在吉非替尼作用下IGFR-1β和p-IGFR-1β的表达 Lovo：表达及其活性变化不显著 HT29：表达无改变，但活性明显升高 HCT116：表达及活性无明显变化 ，但基础活性高 IGFR-1β活性增高与结肠癌细胞对吉非替尼敏感性降低有关 结肠癌细胞在吉非替尼作用下IGF-II的mRNA 表达水平 HT29：表达水平明显增高 Lovo和HCT116较各自的对照组均无明显变化 HT29细胞在吉非替尼作用下自分泌IGF-II增加，因而IGFR-1β活性增高。 IGFR-1β酪氨酸激酶抑制剂AG1024对结肠癌细胞EGFR和IGFR-1β信号通路活化状态的影响 吉非替尼联合AG1024可抑制HT29细胞AKT、MAPK的活性，而单独应用AG1024即可阻断HCT116细胞AKT、MAPK的持续性活化。 AG1024对Lovo 、HT29、HCT116细胞周期和凋亡的影响 吉非替尼联合AG1024可引起HT29细胞G1期阻滞、细胞凋亡增加，而AG1024单药即可引起HCT116细胞G1期阻滞、细胞凋亡增加。 *