[收稿日期]20130329.doc

[收稿日期[基金项目]计划项目（2012CB518406）[通作者]Tel：(010mail:yjqiao@263.net [作者简介]Tel：(010)Email:liuyingtcm@ 苦碟子药材及其注射液中化学成分的HPLC-ESI-MSn分析 刘颖1,2, 卢建秋, 张加余1,2, 王放, 王青, 乔延江(1．北京中医药大学 科研实验中心，北京 100029；2．北京中医药大学 中药学院，北京 100102)苦碟子学名抱茎苦荬菜 Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance菊科苦荬菜属植物抱茎苦荬菜苦碟子中主要苷、有机酸、黄酮、倍半萜内酯和木脂素类。1材料 Agilent 1100 型液相色谱仪二元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器、Chem Station 工作站Agilent 科技有限KQ-250DE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Millipore Synergy UV 型超纯水机（美国 Millipore 公司）；R200D 型电子分析天平（德国 Sartorius 公司）。 尿苷（批号：120809）鸟苷（批号：120731），购买于上海融禾医药科技有限公司腺苷（批号：110879-200202）、咖啡酸（批号：110885-200102）木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（批号：11720-201106）和木犀草素批号：111520-200504，购于中国食品药品检定研究院3,4-二咖啡酰奎宁酸3,5-二咖啡酰奎宁酸,5-二咖啡酰奎宁酸购于成都普瑞法科技开发有限公司菊苣酸素-7-O-β-D-葡萄糖苷购于成都德天生物科技有限公司纯度均大于9%。吉林通化华夏药业有限责任公司生产的苦碟子注射液凭处方购于北京中医药大学东方医院。苦碟子责任菊科苦荬菜属植物抱茎苦荬菜 I sonchifolia的干燥地上部分；甲醇、乙腈（色谱纯，德国 Merck），乙酸（色谱纯，美国 Tedia）所用水为超纯水（18.2 MΩ·cm，25 2方法与结果 2.1溶液制备腺苷、咖啡酸菊苣酸3,4-二咖啡酰奎宁酸3,5-二咖啡酰奎宁酸,5-二咖啡酰奎宁酸木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷素-7-O-β-D-葡萄糖苷木犀草素 2.1.2供试品溶液的制备 取苦碟子药材粉末适量，加甲醇超声提取30 min，静置，上清液经0.22 μm微孔滤膜过滤，即得。取吉林通化华夏（批号：120414）生产苦碟子注射液两支，混合后经0.22 μm 微孔滤膜过滤，即得。 2.2分析条件 条件Thermo BDS hypersil C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm, 5 μm），流速1.0 mL·min，检测波长254 nm，柱温30，进样量5 μL，流动相为乙腈A）：0.5%乙酸溶液B），洗脱梯度为：0 min，2%A），15 min，8%A），30 min，18%A），45 min，21%A），55 min，28%A）。 质谱条件采用ESI源，负离子模式，雾化气压力×105 Pa（N2，＞99.99%，干燥气流速（N2，＞99.99%）11.0 L·min，干燥气温度350，毛细管电压3.5 kV，全扫描范围为m/z 100800，3 级碎片扫描，多级质谱的碰撞电压为1 V。 Fig.1 HPLC chromatograms of standards (A), I. sonchifolia( B) and its injection(C) t/min 图2 对照品（A）、苦碟子药材（B）和苦碟子注射液（C）TIC（-）图 Fig. 2 Total ion chromatogram of standards (A), I. sonchifolia( B) and its injection(C) in negative mode 表1 HPLC-ESI-MS/MS法苦碟子药材及其注射液的各峰归属 Table 1 MS and MS /MS data obtained from sample of I. sonchifolia and its injection No. tR [M - H]- m/z 二级质谱碎片相对强度 m/z 三级质谱碎片相对强度 m/z 成分归属 1 5.0 2431) 2001)(100),111(27) 111(100),140(27) uridine 24) 7.4 2821) 1501)(100) 133(100) guanosine 35) 8.8 3261)3) 2661)(100) 134(100) adenosine 44)7) 11.0 3531) 1911)(100),179(4) 173(100),127(47)