FLT3基因突变与IL-3受体α在急性髓系白血病的表达意义.pdf

叠韭韭燮2008 42 。。 May，v。1“7… F MedUniv 199 ujian FLT3基因突变与IL一3受体a在急性髓系白血病的表达意义 昊 勇1，陈景龙2，骆社丹1，陈元仲1 摘要： 义。 FLT3／ITD与D835突变。结果 胞比例高，完全缓解率低。 结论IL-3Ra高表达和FLT3基因突变均赋予急性髓系白血病细胞增殖优势，检测 两者水平对于评价AML患者疗效、估计预后具有重要意义。 关键词：受体蛋白质酪氨酸激酶；串联重复序列；突变；受体，白细胞介素3；白血病，粒细胞，急性 中图分类号： R733．712．2；R394．2文献标识码： A 文章编号： 1672—4194(2008)03-0199-04 leukemia， 急性髓系自血病(acutemyeloid 单核细胞白血病(M。)6例，外周血幼稚细胞均 AML)是一种涉及多基因遗传学改变的恶性血液60％，用淋巴细胞分离液密度梯度离心分离外周血 病，其特征为细胞分化成熟受阻，未分化细胞大量 单个核细胞(MNC)，用PBS液洗涤细胞2遍， 增殖。目前认为白血病幼稚细胞起源于被称为白 --80。C保存备用。同时采集4例正常人外周血单 stem 血病干细胞(1eukemiacell，LSC)的细胞，而个核细胞为对照。 LSC则被认为是由相应的正常细胞发生至少两次 1．1．2 RT 突变后形成的异常产物。FLT3基因(FMS样酩氨 kit，德国Qia— 公司)，反转录试剂盒(0mniscript 酸激酶3，FMS-liketyrosinekinase-3)是Ⅲ型酪氨gen公司)，PCR试剂盒(HotStarTaqMastermix 酸激酶家族成员的原癌基因，FLT3基因突变是kit，德国Qiagen公司)，限制性内切酶EcoRV(美 AML最常见的基因突变，主要包括内部串联重复 国New England tandem 突变(internalduplication，ITD)和D835突RESCo公司)。 变。IL-3受体是造血细胞因子受体超家族成员之1．2 细胞总RNA提取及cDNA合成用Trizol 一，IL-3受体a亚基(IL-3Ra，又叫CDl23)是白血 试剂提取细胞总RNA，在紫外分光光度计上读取总 病干细胞的特异性标志，其蛋白表达产物CDl23在RNA的260nm、280 nm吸光度值(D)，要求D26。／ LSC中高度表达，而在正常的造血干细胞中不表达 D。舳1．8。用反转录试剂盒将上述样本的总RNA 或表达很低[1]。本研究旨在探讨两者与急性髓系白 反转录成cDNA，逆转录反应体系20肚L，包括细胞 血病的疗效和预后的关系。 总RNA 1肛g，10×逆转录反应缓冲液2弘L， 5 dNTPs mmol／L oligodT20引 2弘L，10／．￡mol／L 1材料与方法 物2肛L，10U／／1LRNA酶抑制剂1肛L，4U／／』L反 1．1 临床资料