《人脐带间充质干细胞》.pdf
人脐带间充质干细胞
1范围
本文件规定了人脐带间充质干细胞的技术要求、检验方法、检验规则、使用说明、标签、包装、储
存、运输和废弃物处理要求。
本文件适用于人脐带间充质干细胞的生产和检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
WS213丙型肝炎诊断
WS273梅毒诊断
WS293-2019《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》
T/CSCB0001-2022《人干细胞研究伦理审查技术规范》
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则
中华人民共和国药典（2020年版）
全国临床检验操作规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
间充质干细胞mesenchymalstemcells
1
主要来源于中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于全是多种组
织中，可在体外培养扩增，并在特定条件下分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。
3.2
人脐带间充质干细胞humanumbilicalcordmesenchymalstemcells
来源于人脐带华氏胶组织，贴壁培养后呈纺锤形和梭形的成纤维细胞态，可在体外自我更新并具有
成骨、成脂、成软骨等分化能力的间充质干细胞。
4符号和缩略语
下列符号和缩略语适用于本文件。
CD——分化簇（ClusterofDifferentiation）
DNA——脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）
EBV——疱疹病毒（Epstein-BarVirus）
HBV——乙型病毒性肝炎（HepatitisBVirus）
HCMV——人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus）
HCV——丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）
HIV——人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）
HLA-DR——人类白细胞抗原-DR（HumanLeukocyteAntigen-DR）
HTLV——人类嗜T细胞病毒（HumanT-lymphotropicVirus）
IDO——吲哚胺2,3-双加氧酶（Indoleamine2,3-dioxygenase）
IFN-γ——干扰素-γ（Interferon-γ）
TNF-α——肿瘤坏死因子-α（TumorNecrosisFactor-α）
PCR——聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）
STR——短串联重复序列（ShortTandemRepeat）
TP——梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）
5技术要求
2
5.1原材料和辅料
5.1.1应符合T/CSCB0001-2022要求。
5.1.2应建立供者细胞采集的供者评估与筛选标准、采集方法、运输标准和交接标准，保证供者和细
胞的安全。
5.1.3供体应筛查HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV和TP，并记录结果。
5.2分离与培养方法
5.2.1分离及提取
采用组织块贴壁法从脐带华氏胶组织中分离培养脐带间充质干细胞。进行人脐带间充质干细胞原代
培养。
5.2.2人脐带间充质干细胞换液
根据细胞的生长情况换液。
5.2.3人脐带间充质干细胞传代
传代操作应密度适宜、及时、迅速。
5.2.4人脐带间充质干细胞冻存
冻存细胞程序降温后置液氮中保存。
5.2.5人脐带间充质干细胞复苏
取出冻存管进行快速融化，离心洗涤后进行培养。
5.2.6人脐带间充质干细胞溶液
人脐带间充质干细胞溶液为均质状态，无絮状沉淀，细胞存活率≥90％。
5.3关键质量属性
5.