大孔树脂吸附提炼红霉素及纯化工艺的研究.doc

大孔树脂吸附提炼红霉素及纯化工艺的研究 摘要 红霉素是由微生物发酵法产生的大环内酯类抗生素，抗菌谱较广。在红霉素产业链 中，硫氰酸红霉素是一种重要的医药中间体。本文采用大孔吸附树脂进行提炼发酵液中 的红霉素，结晶得到产品硫氰酸红霉素并进行纯化。 本工艺主要流程是将发酵液采用微滤膜过滤，得到澄清液，采用大孔树脂吸附，然 后经过碱性缓冲液洗涤后，使用醋酸丁酯洗脱，洗脱液结晶得到产品硫氰酸红霉素。在 发酵液中红霉素B、C含量偏高的情况下，采用丙酮-水溶剂体系进行重结晶纯化。本文 主要对大孔树脂吸附分离红霉素工艺的影响因素进行了分析研究，并提出了重结晶纯化 工艺。 1.本文首先确定了本工艺的分析方法，比较了化学效价测定方法和高效液相色谱 分析方法在收率计算中的差异，发现高效液相色谱能够更准确的反映大孔吸附树脂提炼 红霉素工艺。 2.本文研究了大孔树脂吸附提炼红霉素工艺，实验发现大孔吸附树脂能够有效的从 发酵液中吸附富集红霉素，发酵液效价在3000?4000u/ml时，1BV的树脂可处理15?20BV 的发酵液，醋酸丁酯能够充分洗脱富集在树脂上的红霉素A且用量少仅为2BV，全过 程收率在75%以上。 3.经过多次实验发现发酵液质量是本工艺的主要影响因素之一，直接关系到产品质 量。若发酵液中红霉素A的相对百分含量高于68%，红霉素B、C的含量低于3%，将 洗脱液成盐结晶即可得到合格品。若发酵液中红霉素B、C的含量较高，需进行重结晶 以获得高品质产品。本文建立了硫氰酸红霉素在丙酮-水溶剂体系中重结晶工艺，并确 定了工艺条件。重结晶后红霉素A的收率达85%，红霉素C含量降低50%?60%。 关键词：红霉素；醋酸丁酯；丙酮；重结晶 目录 m § 1 第1章文献综述 2 1.1红霉素简介 2 1.1.1 红霉素化学结构 2 1.1.2红霉素理化性质 3 1.1.3 红霉素的衍生物药品 3 1.1.4硫氰酸红霉素生产状况 4 1.2红霉素生产提炼工艺 4 1.2.1 萃取法 5 1.2.2膜分离技术 5 1.2.3离子交换法 6 1.2.4 吸附法 6 1.2.5 8 1.3 本文研究内容 8 第2章分析方法的确立 11 2.1 弓唁 11 2.2红霉素效价测定原理 11 2.3 实验仪器及试剂 12 2.4化学效价测定方法 12 2.4.1 绘制标准曲线 13 2.4.2效价测定步骤 13 2.5红霉素组分含量测定方法 14 2.6效价和HPLC组分测定结果差异 15 第3章大孔树脂吸附提炼红霉素工艺影响因素 18 3.1弓唁 18 3.2实验材料及方法 19 3.2.1实验原料及器材 19 3.2.2 实验装置图 19 3.2.3红霉素组分含量计算方法 20 3.2.4 实验方法 21 3.3 实验结果与分析 23 3.3.1大孔树脂吸附纯化红霉素工艺叮行性的研究 23 3.3.2发酵液质景考察及其影响分祈 24 华东理工大学硕士学位论文 3.3.3 洗涤过程pH变化的考察 24 3.3.4洗脱能力及其用量的考察 25 3.3.5 红霉素结晶工艺优化 27 3.3.6大孔吸附树脂稳定性的考察 30 3.4本章小结 31 第4章重结晶 33 4.1 前 33 4.2实验方法及装置 35 4.2.1 实验设备 35 4.2.2 实验装置图 35 4.2.3 实验方法 36 4.3实验结果及分析 38 4.3.1硫氰酸纟[霉素在水-丙酮体系中的溶解度 38 4.3.2硫氰酸釘霉素重结品pH的影响 40 4.3.3丙酮中硫氰酸红霄素浓度的影响 42 4.3.4硫氰酸红霉素重结晶养晶时间的考察 43 4.3.5硫氰酸红霉素重结晶温度的影响 45 4.3.6溶剂体系中水-丙酮体积比的影响 46 4.3.7减压蒸馏结晶的研究 47 4.3.8硫氰酸红霉素重结晶工艺验证 48 4.4 本章小结 49 第5章结论及展望 50 5.1 鮮 50 5.2展望 51 52 顏 56 学位论文 第1页 、* — iLi.. wim 大环内醋类抗生素是含有一个大环内酯的物质，经过轻基、苷键与1至3个分子的 糖相连接，大环内酯类抗生素中人们研究最多且早已投入生产的是红霉素，红霉素及其 衍生物现在临床上的应用约有20多个品种。红霉素是一种广谱抗生素，主要针对革兰 阳性菌有很强的作用，其独到之处是对有药物过敏反应的呼吸道感染有很好的疗效，特 别是针对衣原体、支原体肺炎，红霉素是首选药物。 目前工业生产上红霉素最普遍的分离提炼方法是溶媒萃取法，溶媒萃取的主要缺点 是乳化