放射免疫分析课件.ppt

放射免疫分析

Radioimmunoassay一、原理：Ag+AbAgAb+Ag+*Ag*AgAb+*Ag*Ag和Ab量恒定競爭結合++++6—8X100=75%X100=50%X100=25%X100=12.5%8—4—828—1結論*AgAb複合物的量取決於Ag的量Ag量越大，*AgAb量越少Ag量越小，*AgAb量越大測量*AgAb量或測量多餘*Ag量可推算出Ag量二、測量步驟恒量的*Ag、Ab加入反應管中加入待測樣品、或標準品（已知濃度）37℃或4℃溫育加入分離劑分離結合及游離部分測定以總放射性為分母，測定*AgAb為分子，計算結合%，以結合率為縱坐標，濃度為座標，製作標準曲線待測樣品的結合率從標準曲線上求出濃度02481632641288070605040302010結合%濃度三、放免分析基本條件標準品標記抗原特異抗體分離劑——分離結合與游離部分分離劑要求快速而完全分離操作簡便、來源容易、價格便宜不受血清、外界條件及其它試劑的干擾適用於任何容積的反應液非特異結合率小常用液相分離技術雙抗體法特點：分離完全，非特異結合小，環境影響小，效價高，但成本高沉澱法聚乙二醇（w=6000）特點：快速，價廉，來源方便，受環境影響大常用液相分離技術（續）吸附法吸附游離部分，適用於分離小分子游離抗原。活性炭、纖維素粉末特點快速、簡便、準確性差鹽析法飽和硫酸胺、硫酸鈉固相分離技術，按材料不同，可分為試管法、顆粒法、小盤法、紙片法四、放免分析的優點靈敏度高特異性強精確度高用血量少體外測量單位換算1g=1000mg1mg=1000μg1μg=1000ng1ng=1000pg