造血干细胞移植.ppt

（2）植活的间接证据：受者发生急、慢性GVHD。

（3）骨髓重建的证据：移植后2－4周，受者网织红细胞、粒细胞、淋巴细胞和血小板迅速增高，并逐渐重建造血免疫功能。

第30页，共68页，星期日，2025年，2月5日四、自身骨髓移植

（一）自身骨髓的采集和保存

骨髓的采集在手术室内予以硬膜外麻醉下进行，儿童则采用全身麻醉。穿刺部位选择在左、右前后髂上棘和胸骨，儿童可选择胫骨上端等部位。

ABMT需有核细胞总数5.0～30.0×109（0.5～5.0×108/kg体重），骨髓粒系祖细胞（CFU－C）平均1.0～4.0×104/kg体重。

第31页，共68页，星期日，2025年，2月5日骨髓液按等量比例与保养液混和，经不同孔径（0.201～0.307mm）的不锈钢滤网，滤去骨髓中脂肪颗粒和碎片。在混有红细胞和骨髓液中每亳升加入肝素15-20U，4℃保存36～48小时后回输。也可应用10％二甲亚砜作为骨髓冷冻保护剂，使骨髓保存于－196℃的液氮中。第32页，共68页，星期日，2025年，2月5日（二）骨髓净化

目前国际上将净化方法分为两大类：即负净化也称阴性选择：将肿瘤细胞从移植物中清除掉；正净化也称阳性选择：将正常造血干细胞从移植物中分离纯化。临床上应用方法多为负净化。但无论是物理学、生物学或其他方法都还不够理想。

第33页，共68页，星期日，2025年，2月5日（三）自身骨髓移植前预处理

ABMT的预处理目的是：①使骨髓产生一定空间，使造血干细胞有植入和增殖的场所；②进一步清除体内肿瘤细胞。

精典的方案CTX加全身照射（TBI）或分次全身照射（FTBI）进行预处理。肺需要适当屏蔽。

第34页，共68页，星期日，2025年，2月5日（四）骨髓回输：同前

（五）自身骨髓移植后造血功能恢复（植活标志）

ABMT后外周血白细胞从无恢复到1.0×109/L平均需16－21天；血小板恢复50×109/L平均需14－21天，粒细胞恢复0.5×109/l，平均21天。

第35页，共68页，星期日，2025年，2月5日外周血造血干细胞移植

第36页，共68页，星期日，2025年，2月5日一、外周血干细移植类型

外周血造血干细胞移植可分为：（1）自体外周血干细胞移植（APBSCT）

（2）异基因外周血造血干细胞移植（Allo-PBSCT)。

供受体选择及移植前准备同骨髓移植。

第37页，共68页，星期日，2025年，2月5日二、外周血干细胞的动员与采集

（一）动员

在正常生理条件下，外周血干细胞数量很少，只有骨髓造血干细胞量的

1～10％，因此，不能满足临床PBSCT数量的需要。常用动员剂有以下几类：

1．重组人造血生长因子第38页，共68页，星期日，2025年，2月5日2．抗肿瘤化疗药物

（1）最大限度地杀灭患者体内的肿瘤细胞；

（2）在杀伤肿瘤细胞同时，也使正常造血细胞受到损害，但由于正常造血细胞恢复时间比肿瘤细胞短，故当骨髓抑制解除时和正常造血细胞恢复之际，外周血干细胞数量反馈性增加达25～100倍，从而起到了造血干细胞动员效果。国内常用药物有环磷酰胺；阿糖胞苷。第39页，共68页，星期日，2025年，2月5日采集前动员方案选择要根据恶性肿瘤的类型和患者的具体情况而定。

白血病或恶性淋巴瘤晚期等血液系恶性肿瘤作自身的PBSCT时，以选择抗肿瘤化疗药物作为动员剂量为适宜。

而对于Allo-PBSCT供者宜选用GM－CSF或G－CSF。

第40页，共68页，星期日，2025年，2月5日（二）采集

1．采集时机选择：

（1）动员化疗结束后2－3周，外周血白细胞计数升至（1.0-2.0)×109/L时。倘若单用G-CSF动员宜在白细胞计数升至（5.5-10.0）×时，血小板计数?50×109/L；

（2）外周血CD34阳性细胞?1％（正常为0.2?0.1％）。但采集时机仍需根据患者的当时情况而定。

第41页，共68页，星期日，2025年，2月5日2．方法：

运用血细胞分离机如FenwallCS3000，分离3－4次或COBESPECTRA分离1－2次，直至采集到造血功能重建所需的细胞数。

第42页，共68页，星期日，2025年，2月5日四、外周血干细胞净化

净化方法有也是二种：阳性选择和阴性选择。

五、外周血干细胞体外扩增

为了确保PBSCT后成功的造血重建，CD34＋细胞不应低于2.5×106/kg。因此，可采用部分CD34＋细胞进行体对扩增。

第43页，共68页，星期日，2025年，2月5日六、外周血干细胞的冻存

通常每次经血细胞分离机分离后所得的细胞悬