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纤维素酶固定化研究.pdf

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第 l3卷 第5期 哈 尔 滨 理 ]二大 学 学 报 Vo1.13 NO.5 2008年 10月 J0URNALHARBIN UNIV.SCI. TECH. Oct.,2008 纤维素酶固定化研究 董学卫, 朱启忠,.于秀敏, 吕新萍, 徐国英, 于 涛 (ih东大学威海分梭海洋学院,山东威海 264209) 摘 要:采用交联法制备了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG—CS)载体,并将其用于固定纤维素酶. 探讨 了载体制备过程 中的几种主要影响因素、纤维素酶固定化的影响因素,并对固定化纤维素酶的 性质进行了讨论.结果表明,固定化酶最适pH值比原酶降低,最适温度为60cC,比游离酶高l0℃. 在pH值为5.0,温度40 时,固定化酶对羧 甲基纤维素钠盐的表观米氏常数为7.2mg/L,而游离 酶为3.3m l.与游离酶相比,该固定化纤维素酶热稳定性明显提高,并具有 良好的操作和存储稳 定性. 关键词:聚乙二醇改性壳聚糖;纤维素酶;固定化;裁体 中图分类号:Q55 文献标识码:A 文章编号:1007—2683(2008)05—0118—05 StudiesonPropertiesofImmobilizedCellulaseonaCarrier DONGXue-wei, ZttUQi—zhong, YUXium·in, LVXin-ping,XUGuo—ying, YUTa0 (MarineCollege,ShandongUniversityatWeihai.Weihai264209,China) Abstract:PEG—CS(chitosanmodifiedbypolyethyleneglyco1)waspreparedalldappliedtoimmobilizecellu— lase.riteimmobilizationconditionsandpropertiesoftheimmobilizedenzymeO11PEG—CSwerestudied.Theim- mobilizedenzymeexhibitsthemaximalactivityatpH 4.0.Theoptimaltemperatureofimmobilizedenzymeisat 60 ,higherthanfleecellulase.Inaceticacid—sodium-acetatebuffer(pH5.0,40~C),theK forCMCNaofim— mobrilizedcellulaseandfreecellulaseareseparately7.2mg/Land3.3mg/L,SOtheaffinityofcellulasedecreases afterbeingimmobilized.Thethermal-,operational-,andstorage·stabilitiesoftheimmobilizedenzymeareobviously increasedcomparedtothoseofthefreeone. Keywords:PEG—CS;cellulase;immobilizafion;earrier 纤维素是光合作朋的产物,现有大量关于将纤 性,广泛厢于废水处理、农业、医药、化工、食品等领 维素降解为葡萄糖,随后生产酒精的物理、化学及生 域 .虽然研究表明,壳聚糖是酶固定化的优 良载 物的方法.利,丰j纤维素酶降解纤维素的选择性高、反 体,壳聚糖结合纤维素酶的能力还没有充分进行研 应条件温和.南于纤维素酶吸附到纤维索上,在反应 究.壳聚糖的结合量因为不同的改 良方法而不一样. 器中进行搅拌 ¨及产物的抑制作用使得酶失活,使 普通壳聚糖颗粒体积为(ea5OO_300um)j,对蛋 它不适于实际应州.现在已有将其固定在惰性载体 自质的装载能力较小 (50rng/g) ,固定化酶的 £使它可以重复、稳定使用的报道.如纤维素酶固定
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