新型冠状病毒检测技术规范血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序.docx

新型冠状病毒检测技术规范血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序

一、检测前准备

（一）人员要求

检测人员应经过专业培训，熟悉新型冠状病毒血清学检测相关知识和胶体金免疫层析检测技术原理、操作流程及结果判读标准。严格遵守生物安全操作规范，做好个人防护，包括穿戴工作服、一次性工作帽、N95及以上防护口罩、防护手套等。

（二）样本准备

1.样本采集

-采用静脉采血法采集受检者血液2-3ml，将血液标本置于干燥、无菌的试管中。

-告知受检者采血前无需空腹，采血时避免过度紧张。

2.样本处理

-标本采集后室温放置30-60分钟，待血液自然凝固。

-以3000-3500r/min离心10-15分钟，分离血清。

-血清应清澈透明，若有溶血、脂血等情况可能影响检测结果，需重新采集标本或标记样本情况。

3.样本保存与运输

-若不能及时检测，血清标本可在2-8℃保存3天，长期保存则需置于-20℃以下。

-样本运输应使用专门的运输箱，箱内放置适量的冰袋，确保样本处于低温状态，同时做好运输记录。

（三）试剂与耗材准备

1.选择经国家药品监督管理局批准的新型冠状病毒血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂，并确保在有效期内使用。检查试剂盒外观是否完好，试剂有无变色、沉淀等异常情况。

2.准备一次性移液器、吸头、计时器、生物安全垃圾桶等相关耗材，移液器要定期进行校准，确保移液准确性。

（四）检测环境准备

1.检测应在符合生物安全要求的实验室内进行，保持室内清洁、通风良好。

2.检测前用75%乙醇对操作台进行擦拭消毒，检测过程中避免无关人员进入。

二、检测操作步骤

1.试剂平衡

-将检测试剂从冰箱取出后，置于室温（18-25℃）平衡30分钟，以保证试剂的活性和检测结果的准确性。

2.加样

-使用一次性移液器吸取待检血清样本，垂直悬空滴加3-4滴（约100-120μl）到检测卡的加样孔中，注意不要使吸头接触加样孔边缘，避免样本交叉污染。

3.计时反应

-加样后立即开始计时，将检测卡平放在水平台面上，等待试剂反应。一般在15-20分钟内观察结果，超过30分钟的结果判读无效。

三、结果判读

1.阴性结果

-仅在检测卡的质控区（C线）出现一条红色条带，而检测区（IgM和IgG线）均无条带出现，表明样本中未检测到新型冠状病毒IgM和IgG抗体。

2.阳性结果

-IgM阳性：质控区（C线）和IgM检测区（M线）均出现红色条带，提示可能处于感染早期。

-IgG阳性：质控区（C线）和IgG检测区（G线）均出现红色条带，提示可能既往感染或处于感染恢复期。

-IgM和IgG双阳性：质控区（C线）、IgM检测区（M线）和IgG检测区（G线）均出现红色条带，提示处于感染期，但需要结合临床症状和其他检测结果综合判断。

3.无效结果

-质控区（C线）未出现红色条带，无论检测区（M线和G线）是否有条带出现，结果均无效。可能原因包括试剂失效、加样量不足、操作不当等，需重新进行检测。

四、质量控制

1.内部质量控制

-每次检测应同时使用阳性和阴性对照样本进行平行检测。阳性对照样本在质控区（C线）、IgM检测区（M线）和IgG检测区（G线）应出现红色条带；阴性对照样本仅在质控区（C线）出现红色条带。

-定期对检测设备和试剂进行性能验证，记录验证结果。如发现对照样本结果异常，应停止检测，查找原因并采取相应的纠正措施。

2.参加室间质量评价

-实验室应定期参加省级或国家级组织的新型冠状病毒血清学检测室间质量评价活动，以评估实验室的检测能力和准确性，确保检测结果的可靠性和可比性。

五、检测后处理

1.废弃物处理

-将使用后的检测卡、移液器吸头等废弃物放入专用的生物安全垃圾袋中，进行高压蒸汽灭菌处理后，按医疗废弃物处理规定进行处置。

-检测结束后，用75%乙醇再次对操作台进行擦拭消毒。

2.数据记录与报告

-详细记录样本信息、检测时间、检测结果等相关数据，建立检测档案。

-检测报告应包括受检者基本信息、检测项目、检测结果（阴性、阳性或无效）以及报告时间等内容，由检测人员和审核人员签字确认后发放给临床科室或相关部门。

六、注意事项

1.样本要求

-避免使用严重溶血、脂血、黄疸或被微生物污染的样本，若样本有絮状物等沉淀，应先离心后取上清液进行检测。