植物组织培养 (2).ppt

●Skoog(1944)和崔澄（1948），通过对烟草茎段和髓培养发现，不定芽和不定根的发生由生长素/腺嘌呤的比例决定。●1952年，Morel和Martin首次证实，通过茎尖分生组织的离体培养，可以由已受病毒侵染的大丽花中获得无病毒植株。●1953年，Muir进行单细胞培养获得初步成功。●1956年，Miller等由鲱鱼精子DNA中分离出一种首次为人所知的细胞分裂素，并把它定名为激动素(kinetin)。●1957年，Skoog和Miller提出了有关植物激素控制器官形成的概念。●1958年，Steward等以胡萝卜为材料，首次通过实验证实了Haberlandt关于细胞全能性的设想，成为了植物组织培养研究历史中的一个里程碑。第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日1.2.1.3蓬勃发展和应用时期（从20世纪60年代至今）1960年，英国人Cocking用酶法分离原生质体成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交的工作。同年，Morel利用兰花茎尖培养对兰花进行营养繁殖；由于这一方法有巨大的实用价值，很快被兰花生产者所采用，迅速建立起“兰花工业”。1962年，Murashige和Skoog开发出最著名的Murashige和Skoog培养基（MS基本培养基），并被后来广泛采用的基本培养基。第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日1964年，印度人Guha和Maheshwari利用曼陀罗花粉培养获得第一例单倍体植株。从而开辟了单倍体育种技术。●1971年，Takebe等获得第一例原生质体培养的再生植株。●1972年，Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。●1978年，Melchers等进行了番茄和马铃薯的体细胞杂交。●1981年，Larkin和Scowcroft引入“体细胞无性系变异（Somaclonalvariation）”这一术语。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日1982年，Zimmermann利用电刺激进行原生质体融合。开发了原生质体的电融合法。●1983年，Zambryski等用根瘤农杆菌转化烟草，获得首例转基因植物。●1985年，Horsch等用土壤农杆菌对叶盘进行感染和转化，并得到再生的转化植株。●1987年，美国人Sanford等发明了基因枪法用于单子叶植物的遗传转化。第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日第一章绪论1.1植物组织培养的定义与类型1.1.1植物组织培养的定义植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养环境，使其长成完整植株的过程。第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日康乃馨组织培养第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日1.1.2植物组织培养的类型（1）根据培养的植物材料不同分为：①植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。②胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。③器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。④组织培养（包括愈伤组织培养）：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。⑤细胞或原生质体培养：第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日（2）根据培养目的来分①试管嫁接②试管受精③试管加倍④试管育种（3）根据培养方法分①平板培养②微室培养③悬浮培养④单细胞培养第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日（4）根据培养过程分①初代培养（第一代培养）—指将从植物体上分离下来的外植体作第一次组织培养。②继代培养—指第一次培养以后将培养物转移到新的培养基上进行组织培养。（5）根据培养基态相不同分①固体培养——指在培养基中加凝固剂②液体培养——指在培养基中不加凝固剂的组织培养。第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日愈伤组织：原指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在植物组织培养中，是指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。第10页，共47页，星期日，2025年，2月5日外植体：把由活植物体上提取下来接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。第11页，共47页，星期日，2025年，2月5日植物组织培养的理论依据细胞全能性是指植物体任