生物制药技术植物细胞的大规模培养植物细胞大规模培养.pptx
生物制药技术
动植物细胞培养
主讲人:苏艳
任务一、动物细胞的大规模培养
任务二、植物细胞的大规模培养
目录
任务二
植物细胞大规模培养
使组织分散成游离的悬浮细胞,通过继代
培养使细胞增殖,获得大量的细胞群体。
小规模的悬浮培养在培养瓶中进行,大规
模者可利用发酵罐生产。
物细胞的方法。将愈伤组织或其他易分散
的组织置于液体培养基中,进行振荡培养,
植物细胞培养是指在离体条件下培养植
j
植物细胞培养流程和方法
外植体的选择和培养
大规模悬浮培养
摇瓶培养
愈伤化
一
、
1.单倍体细胞培养 主要用花药在人工培养基上进行培养,
可以从小孢子(雄性生殖细胞)直接发育成胚
状体,然后长成单倍体植株;或者是通过
组织诱导分化出芽和根,最终长成植株。
植物细胞培养方法
二、
酶处理后可去掉细胞壁,获得的除去细胞
壁的细胞称为原生质体。该原生质体在良
好的无菌培养基中可以生长、分裂,最终
可以长成植株。
2.原生质体培养
植物的体细胞(二倍体细胞)经过纤维素
起来的植物细胞培养方法。固体培养基的
凝固剂除去特殊研究外,几乎都使用琼脂,
浓度一般为2%~3%,细胞在培养基表面
生长。
3.固体培养
固体培养是在微生物培养的基础上发展
在微生物培养的基础上发展起来的植物
细胞培养方法。液体培养可分为静止培养
设备,适合于某些原生质体的培养。振荡
培养需要摇床使培养物和培养基保持充分
混合以利于气体交换。
和振荡培养等两类。静止培养不需要任何
4.液体培养液体培养
是一种使组织培养物分离或单细胞并不
断扩增的方法。在进行细胞培养时,需要
养,愈伤组织经过悬浮培养可以产生比较
提供容易破裂的愈伤组织进行液体振荡培
5.悬浮培养植物细胞的悬浮培养
纯一的单细胞。
养基础上发展起来的植物细胞培养方法。
该法与固定化酶或微生物细胞类似,应用
最广泛的,能够保持细胞活性的固定化方
法是将细胞包埋于海藻酸盐或卡拉胶中。
6.固定化培养
固定化培养是在微生物和酶的固定化培
三、植物细胞的大规模培养技术
(一)植物细胞的大规模悬浮培养
悬浮培养通常采用水平振荡摇床,可变
速率为30~150r/min,振幅2~4cm,温
悬浮培养的关键就是要寻找适合于悬浮
分化再生能力的培养基。
培养物快速生长,有利于细胞分散和保持
度24~30℃。
抗剪切能力强;
遗传性状较稳定;
后处理难度小;
更好的光合作用;
促进或改变产物的释放。
提高了次生物质的合成、积累;
能长时间保持细胞活力;
可以反复使用;
(二)植物细胞或原生质体的固定化培养
固定化培养具有很多优点:
耐受有毒前体的浓度高;
四、影响植物细胞培养的因素
1.细胞的遗传特性
2.培养环境
由于各类代谢产物是在代谢过程的不同阶段产生的,因此通过植物细胞培养进行次生代谢产物生产所受的限制因子是比较复杂的。各种影响代谢过程的因素都可能对它们发生影响,这些因素主要有光、温度、搅拌、通气、营养、pH值、前体和调
节因子等。