免疫学检验技术原理与应用.pptx
免疫学检验技术原理与应用
演讲人:
日期:
目录
CATALOGUE
02
常用检验技术
03
临床诊断应用
04
质量控制体系
05
技术发展前沿
06
教学培训要点
01
学科基础概述
01
学科基础概述
PART
免疫系统核心组成
免疫器官
免疫分子
免疫细胞
包括中枢免疫器官和外周免疫器官,中枢免疫器官如骨髓和胸腺负责免疫细胞的生成和成熟,外周免疫器官如淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织则负责免疫应答的发动和效应。
包括T细胞、B细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)等,它们在免疫应答过程中起着关键作用,能够识别、活化、增殖和分化为效应细胞。
包括抗体、补体、细胞因子等,它们在免疫应答过程中发挥重要的调节作用,能够增强或抑制免疫细胞的活性,促进或抑制免疫应答的发生。
经典免疫学检验技术
如荧光素标记、酶标记、放射性同位素标记等,这些技术将免疫学与分子生物学技术相结合,提高了检测的敏感性和特异性。
免疫学标记技术
细胞免疫学检验技术
如细胞毒试验、淋巴细胞转化试验、免疫细胞分离和鉴定技术等,这些技术主要用于研究免疫细胞的形态、功能及其与疾病的关系。
包括凝集试验、沉淀试验、补体结合试验等,这些技术主要基于抗原抗体特异性结合的原理,通过检测样本中的抗体或抗原进行疾病诊断。
检验技术发展脉络
抗体功能
抗体具有中和毒素、溶解细胞、调理吞噬、促进细胞毒杀等多种生物功能,在机体免疫防御和疾病发生过程中发挥着重要作用。
抗原的特性
抗原具有免疫原性和免疫反应性,能够刺激机体产生免疫应答,并能与免疫应答产物发生特异性结合。
抗体的结构
抗体由四条肽链组成,包括两条重链和两条轻链,其N端为可变区,能够与抗原表位特异性结合;C端为恒定区,具有生物活性。
抗原抗体结合原理
抗原表位与抗体可变区特异性结合,形成抗原-抗体复合物,这一过程是特异性的,且结合力较强,可用于免疫学检测。
抗原抗体反应原理
02
常用检验技术
PART
凝集反应类型与应用
颗粒性抗原凝集试验
通过抗体与充分致敏的颗粒性抗原结合,使颗粒凝集为肉眼可见的凝集物,如细菌凝集试验、红细胞凝集试验等。
可溶性抗原凝集试验
免疫浊度法
利用可溶性抗原与相应抗体结合,在电解质作用下形成沉淀物,如血清蛋白质沉淀反应。
通过检测抗原-抗体反应产生的浊度变化来测定样品中抗原或抗体的含量,如胶乳凝集试验。
1
2
3
通过检测样品中特异性抗体与包被在固相载体上的抗原结合后,再与酶标二抗结合,测定酶活性来判定样品中抗体的含量。
酶联免疫吸附试验(ELISA)
间接ELISA
利用两个特异性抗体分别包被固相载体和作为酶标抗体,通过夹心反应检测样品中抗原的含量。
夹心ELISA
利用待测样品中的抗原与酶标抗原竞争结合特异性抗体的原理,测定样品中抗原的含量。
竞争ELISA
免疫荧光技术流程
直接免疫荧光法
免疫荧光层析法
间接免疫荧光法
将特异性荧光抗体直接滴加在充分洗涤后的受检标本上,经孵育、洗涤后,在荧光显微镜下观察特异性荧光。
先用“一抗”与受检标本中的抗原结合,再用荧光素标记的“二抗”与“一抗”结合,形成抗原-抗体-荧光素复合物,在荧光显微镜下观察荧光。
利用层析原理,将待测样品滴加在层析膜上,通过毛细作用使样品向膜上迁移,并与膜上的荧光抗体结合,形成荧光复合物,通过观察荧光复合物的位置和强度来判断待测物的含量。
03
临床诊断应用
PART
传染病血清学检测
抗体检测
通过检测患者血清中特异性抗体,诊断相关传染病,如麻疹、风疹、乙肝等。
01
抗原检测
利用特异性抗体检测病毒抗原,用于早期诊断和快速筛查,如流感病毒、登革热病毒等。
02
病原体核酸检测
采用PCR等技术检测病原体核酸,提高诊断敏感性和特异性,如HIV、结核分枝杆菌等。
03
检测患者血清中自身抗体,辅助诊断自身免疫病,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。
自身抗体筛查
通过自身抗体谱检测,了解自身免疫病的抗体分布,为临床分型和治疗提供依据。
自身抗体谱分析
研究自身抗体的致病机制,为自身免疫病的治疗提供新思路,如抗磷脂抗体综合征。
抗体功能分析
自身免疫病抗体分析
蛋白质类标志物
如癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)等,用于肿瘤的早期筛查和诊断。
肿瘤标志物定量检测
糖类标志物
如CA19-9、CA125等,与某些肿瘤的发生和发展相关,可用于肿瘤的辅助诊断。
酶类标志物
如前列腺特异性抗原(PSA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)等,具有组织特异性,有助于肿瘤的定位诊断。
04
质量控制体系
PART
标准物质与校准品使用
标准化管理
确保免疫学检验中所使用的标准物质和校准品符合国际或国内标准,以保证结果的准确性。
01
定期对仪器进行校准,确保检测结果的准确性和稳定性。
02
适用性评估
在使用新的标准物质或校准品前,需进行