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免疫学检验技术原理与应用.pptx

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免疫学检验技术原理与应用

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CATALOGUE

02

常用检验技术

03

临床诊断应用

04

质量控制体系

05

技术发展前沿

06

教学培训要点

01

学科基础概述

01

学科基础概述

PART

免疫系统核心组成

免疫器官

免疫分子

免疫细胞

包括中枢免疫器官和外周免疫器官,中枢免疫器官如骨髓和胸腺负责免疫细胞的生成和成熟,外周免疫器官如淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织则负责免疫应答的发动和效应。

包括T细胞、B细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)等,它们在免疫应答过程中起着关键作用,能够识别、活化、增殖和分化为效应细胞。

包括抗体、补体、细胞因子等,它们在免疫应答过程中发挥重要的调节作用,能够增强或抑制免疫细胞的活性,促进或抑制免疫应答的发生。

经典免疫学检验技术

如荧光素标记、酶标记、放射性同位素标记等,这些技术将免疫学与分子生物学技术相结合,提高了检测的敏感性和特异性。

免疫学标记技术

细胞免疫学检验技术

如细胞毒试验、淋巴细胞转化试验、免疫细胞分离和鉴定技术等,这些技术主要用于研究免疫细胞的形态、功能及其与疾病的关系。

包括凝集试验、沉淀试验、补体结合试验等,这些技术主要基于抗原抗体特异性结合的原理,通过检测样本中的抗体或抗原进行疾病诊断。

检验技术发展脉络

抗体功能

抗体具有中和毒素、溶解细胞、调理吞噬、促进细胞毒杀等多种生物功能,在机体免疫防御和疾病发生过程中发挥着重要作用。

抗原的特性

抗原具有免疫原性和免疫反应性,能够刺激机体产生免疫应答,并能与免疫应答产物发生特异性结合。

抗体的结构

抗体由四条肽链组成,包括两条重链和两条轻链,其N端为可变区,能够与抗原表位特异性结合;C端为恒定区,具有生物活性。

抗原抗体结合原理

抗原表位与抗体可变区特异性结合,形成抗原-抗体复合物,这一过程是特异性的,且结合力较强,可用于免疫学检测。

抗原抗体反应原理

02

常用检验技术

PART

凝集反应类型与应用

颗粒性抗原凝集试验

通过抗体与充分致敏的颗粒性抗原结合,使颗粒凝集为肉眼可见的凝集物,如细菌凝集试验、红细胞凝集试验等。

可溶性抗原凝集试验

免疫浊度法

利用可溶性抗原与相应抗体结合,在电解质作用下形成沉淀物,如血清蛋白质沉淀反应。

通过检测抗原-抗体反应产生的浊度变化来测定样品中抗原或抗体的含量,如胶乳凝集试验。

1

2

3

通过检测样品中特异性抗体与包被在固相载体上的抗原结合后,再与酶标二抗结合,测定酶活性来判定样品中抗体的含量。

酶联免疫吸附试验(ELISA)

间接ELISA

利用两个特异性抗体分别包被固相载体和作为酶标抗体,通过夹心反应检测样品中抗原的含量。

夹心ELISA

利用待测样品中的抗原与酶标抗原竞争结合特异性抗体的原理,测定样品中抗原的含量。

竞争ELISA

免疫荧光技术流程

直接免疫荧光法

免疫荧光层析法

间接免疫荧光法

将特异性荧光抗体直接滴加在充分洗涤后的受检标本上,经孵育、洗涤后,在荧光显微镜下观察特异性荧光。

先用“一抗”与受检标本中的抗原结合,再用荧光素标记的“二抗”与“一抗”结合,形成抗原-抗体-荧光素复合物,在荧光显微镜下观察荧光。

利用层析原理,将待测样品滴加在层析膜上,通过毛细作用使样品向膜上迁移,并与膜上的荧光抗体结合,形成荧光复合物,通过观察荧光复合物的位置和强度来判断待测物的含量。

03

临床诊断应用

PART

传染病血清学检测

抗体检测

通过检测患者血清中特异性抗体,诊断相关传染病,如麻疹、风疹、乙肝等。

01

抗原检测

利用特异性抗体检测病毒抗原,用于早期诊断和快速筛查,如流感病毒、登革热病毒等。

02

病原体核酸检测

采用PCR等技术检测病原体核酸,提高诊断敏感性和特异性,如HIV、结核分枝杆菌等。

03

检测患者血清中自身抗体,辅助诊断自身免疫病,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。

自身抗体筛查

通过自身抗体谱检测,了解自身免疫病的抗体分布,为临床分型和治疗提供依据。

自身抗体谱分析

研究自身抗体的致病机制,为自身免疫病的治疗提供新思路,如抗磷脂抗体综合征。

抗体功能分析

自身免疫病抗体分析

蛋白质类标志物

如癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)等,用于肿瘤的早期筛查和诊断。

肿瘤标志物定量检测

糖类标志物

如CA19-9、CA125等,与某些肿瘤的发生和发展相关,可用于肿瘤的辅助诊断。

酶类标志物

如前列腺特异性抗原(PSA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)等,具有组织特异性,有助于肿瘤的定位诊断。

04

质量控制体系

PART

标准物质与校准品使用

标准化管理

确保免疫学检验中所使用的标准物质和校准品符合国际或国内标准,以保证结果的准确性。

01

定期对仪器进行校准,确保检测结果的准确性和稳定性。

02

适用性评估

在使用新的标准物质或校准品前,需进行

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