DB4403∕T 122-2020 人源肿瘤细胞系建立技术规范.docx

ICS07.080CCSC04

DB4403

深圳市地方标准DB4403/T122—2020

人源肿瘤细胞系建立技术规范

Technicalspecificationforestablishmentofhumantumorcelllines

2020-11-23发布2020-12-01实施

深圳市市场监督管理局发布

DB4403/T122—2020

I

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 3

5样本获取 3

6细胞建系 4

7质量检测 6

附录A（资料性）捐赠者基本信息表 9

附录B（资料性）肿瘤样本信息表 10

附录C（资料性）主要仪器耗材列表 11

附录D（资料性）细胞传代操作流程 13

附录E（资料性）同工酶分析操作流程 14

附录F（资料性）肿瘤细胞特异性标记物列表 16

附录G（资料性）台盼蓝染色标准流程 17

附录H（资料性）凝集试验操作流程 19

参考文献 20

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II

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由深圳市发展和改革委员会提出和归口。

本文件起草单位：深圳华大生命科学研究院、深圳市标准技术研究院。

本文件主要起草人：岳建辉、马启旺、樊阳波、李睿、叶晶晶、黎泽龙、何娜、侯勇、王博、张曦、何旭珩、李启沅、陈振家。

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1

人源肿瘤细胞系建立技术规范

1范围

本文件确立了人源肿瘤细胞系建立过程中样本获取、细胞建系以及质量检测的操作程序和一般原则。

本文件适用于人源实体肿瘤细胞系相关研究。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB18467献血者健康检查要求YY/T0588流式细胞仪

SZDB/Z238短串联重复序列基因分型法鉴定人源细胞系技术规范ISCN2013人类细胞遗传学国际命名体制

ASN—0003—2015基于线粒体细胞色素氧化酶亚基1（CO1）DNA条形码鉴定动物细胞种属(Species—LevelIdentificationofAnimalCellsthroughMitochondrialCytochromeOxidaseSubunit1(CO1)DNABarcodes）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

供体donor

提供肿瘤样本的捐赠者。3.2

原代细胞primarycell

直接由获取的人体组织或器官制备形成的细胞。3.3

细胞系cellline

由原代细胞群经传代培养获得的细胞群。该细胞群通常是非均质的，且具有明确的特性，可供建库用。

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2

3.4

实体瘤solidtumor

机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致异常增生而形成的新生物。

3.5

平衡盐溶液balancedsaltsolution

组织细胞培养时常用的基本液体，可以维持细胞的渗透压、调节pH值以及提供细胞生存所需的无机离子成分。

注：常用于细胞、组织的洗涤。

3.6

密度梯度离心densitygradientcentrifugation

用一定的介质（如氯化铯、蔗糖和多聚蔗糖）在离心管内形成连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离的方法。

3.7

倍增时间doublingtime

在细胞培养过程中，对数期中细胞数量增加一倍所需的时间。3.8

成瘤性tumorigenicity

细胞接种动物后在注射部位和（或）转移部位由接种细胞本身形成肿瘤能力。3.9

染色体chromosome

遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成的，其形态和数目具有种系的特性。

注：在细胞间期核中，以染色质丝形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。

3.10

同工酶