动态光散射简易操作手册.pdf

激光动态光散射简易操作手册

1、待测样品浓度：对于14kDa的蛋白浓度一般为1mg/ml；28kDa一般为0.5mg/ml。

依此类推

2、样品池为14μl左右，因此一般建议准备20μl。

3、样品一般12,000rpm离心10min，轻取上清。

4、用水冲洗微量取液器和样品池。样品池非常昂贵，请务必小心！

5、微量取液器的针头尽量避免刮到样品池的底部和侧壁。

6、某些样品（高浓度或粒径较大）光散射强度过高时，仪器会出现自保护提示

7、对样品成份及大小需有较好的了解，以利于分析。

一、开机。打开主机和温控两个模块的电源

双击图标，进入程序，显示

可以打开已存在的方法和数据，或可以新建一个方法

二、联机

点击Hardware后点击connect，连接上仪器

Connect后图标变成绿色。选中Parameters，更改其中的相关参数Instrument、

Solvent、Sample。

Instrument：主要参数是激光强度和温度。

Solvent：不通的buffer的折光率和粘连系数是不一样的。此项中选择好Buffer

后参数会自动调整。

Sample：考虑样品的形状。

三、测定

参数设定后，点击即可开始检测。当采集到足够的数据时，再点击一次则数

据采集结束。

四、数据分析

红色数据为超出设定范围的数据，在分析时不采用。一般采集10个显示黑色有

效数据。

Baseline：一般样品的设定偏差为1±0.003，对于纯度非常高的样品可以设置

更小如1±0.001。

SOS：对于均一性不是很好的样品可以不考虑，对于一般较好的样品设定为100。

Intensty：光散射强度。对于均一性较好的样品，此项数据变化幅度较小。

Mvv-R：推测的分子量。

备注：数据过滤。在数据界面，右键，DataFilter。

对于超出偏差范围的数据则显示为红色，并在后期分析中不参与分析。

另外对于某个光散射强度有较大偏动的数据也可以手动去除，右键，Mark。例

如，第3行数据。Mark后即为红色。对于红色数据可以Unmark。

点击图标为分析图

图和数据均可以Copy出来

Peak：每个Peak代表一种物质

R：粒径

%pd：均一性。15以下为非常均一，15~30为一般均一。

%Mass：百分含量

R和%Pd为关注的主要数据。

备注：

对于粒径为0，但是%Mass却是100，往往是由于溶剂造成的，可以忽略；粒

径特别大，但是%Mass却很小的，往往是由于灰尘或溶解的气体造成的，可以

忽略。