第六讲RNA的生物合成与转录后加工.ppt

第62页，共95页，星期日，2025年，2月5日mRNA3′-端的多聚腺苷酸化可被冬虫夏草素（3′-脱氧胸苷）所阻止；即冬虫夏草素是多聚腺苷酸化的特异抑制剂。mRNA的甲基化真核生物mRNA分子中有许多甲基化的碱基，主要是：N6-甲基腺嘌呤（m6A）。第63页，共95页，星期日，2025年，2月5日3.2rRNA前体的加工原核细胞与真核细胞的rRNA前体都需加工：大肠杆菌共有7个转录单位，每个转录单位由16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA及一个或几个tRNA基因组成。第64页，共95页，星期日，2025年，2月5日图5-10p163大肠杆菌rRNA前体加工过程第65页，共95页，星期日，2025年，2月5日真核细胞rRNA基因为串联重复序列：由18SrRNA、28SrRNA、5.8SrRNA基因组成一个转录单位，彼此被间隔区分开。每个重复单位之间的间隔DNA序列不转录，称为非转录间隔序列。真核生物5SrRNA基因也是成簇排列的，中间隔以不被转录的区域，它由RNApolⅢ转录，加工成熟后构成核糖体大亚基。不同生物的rRNA前体大小不同：哺乳动物为45S；果蝇38S；酵母37S；四膜虫35S第66页，共95页，星期日，2025年，2月5日18S5.8S28S18S-rRNA5.8S和28S-rRNA内含子45S转录产物剪接终产物rDNA基因间隔哺乳动物细胞rRNA前体加工过程第67页，共95页，星期日，2025年，2月5日图6-4真核生物的启动子序列第30页，共95页，星期日，2025年，2月5日（2）转录的起始转录起始需解决两个问题：RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。第31页，共95页，星期日，2025年，2月5日4.－10区DNA双链解开12～17bp，形成开放的二元启动子复合物（模板－酶）。2.RNA聚合酶全酶(?2????)与模板－35序列结合，形成闭合的二元闭合启动子复合物。转录起始过程1.?因子辨认转录起始点（-35区的TTGACA序列）3.RNA聚合酶向－10区转移，并与之牢固结合。第32页，共95页，星期日，2025年，2月5日RNApol(?2????)-DNA-pppGpN-OH3?转录起始复合物:5?-pppG-OH+NTP?5?-pppGpN-OH3?+ppi5.在RNA聚合酶β亚基催化下形成第一个磷酸二酯键，形成三元复合物（模板－酶－RNA）。6.当三元复合物中RNA长6～9个核苷酸时，?因子从全酶解离下来，进入延长阶段。RNA聚合酶有两个核苷酸结合位点：一个是起始核苷酸位点；一个是延长核苷酸位点。一般只有嘌呤核苷酸填充了起始位点，才能形成第一个磷酸二酯键。第33页，共95页，星期日，2025年，2月5日RNA合成的第一个核苷酸总有GTP或ATP，以GTP常见，此时?因子从全酶解离下来，靠核心酶在DNA链上向下游滑动，而脱落的?因子与另一个核心酶结合成全酶反复利用。第34页，共95页，星期日，2025年，2月5日真核生物转录起始十分复杂，往往需要多种蛋白因子的协助，已经知道，在所有的细胞中有一类叫做转录因子的蛋白质分子，它们与RNA聚合酶Ⅱ形成转录起始复合物，共同参与转录起始的过程。第35页，共95页，星期日，2025年，2月5日真核生物基因中，有专门为蛋白质编码的基因，这些基因由RNA聚合酶Ⅱ负责进行转录起始关键性作用。根据这些转录因子的作用特点可大致分为以下二类：第36页，共95页，星期日，2025年，2月5日第一类为普遍转录因子：它们与RNA聚合酶Ⅱ共同组成转录起始复合物，转录才能在正确的位置上开始。普遍转录因子是由多种蛋白质分子组成的，其中包括特异结合在TATA盒上的蛋白质，叫做TATA盒结合蛋白，还有形成一组复合物叫做转录因子ⅡD。TFⅡD再与RNA聚合酶Ⅱ结合完成转录起始复合物的形成（图6-5）。第37页，共95页，星期日，2025年，2月5日图6-5转录起始复合物的模式图第38页，共95页，星期日，2025年，2月5日第二类转录因子为组织细胞特异性转录因子或者叫可诱导性转录因子：这类TF是在特异的组织细胞或是受到一些类固醇激素，生长因子或其它刺激后，开始