DB23_T2735—2020_水稻穗颈瘟人工接种鉴定技术规程_黑龙江省.docx
DB23
ICS65.020.20
B38
黑龙江省地方标准
DB23/T2735-2020
水稻穗颈瘟人工接种鉴定技术规程
2021-01-02实施
发布
黑龙江省市场监督管理局
DB23/T2735-2020
前??言
本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。
本标准由黑龙江省农业农村厅提出。
本标准起草单位：黑龙江省农业科学院生物技术研究所。
本标准主要起草人：张国民、马军韬、邓凌韦、赵文生、宋显东、张丽艳、王春荣、胡亚军、王永
力、张齐凤、高洪儒、张君、王南博、任洋。
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水稻穗颈瘟人工接种鉴定技术规程
1范围
本标准规定了水稻穗颈瘟人工接种鉴定技术的术语与定义、环境条件、技术流程、评价标准和技术
档案。
本标准适用于水稻资源、品种（系）等材料对穗颈瘟抗性的人工鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB3095环境空气质量标准
GB5084农田灌溉水质标准
GB15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准（试行）
GB/T15970稻瘟病测报调查规范
NY/T3257-2018稻水稻稻瘟病抗性室内离体叶片鉴定技术规程
下列术语与定义适用于本文件。
穗颈瘟和枝梗瘟
穗颈瘟是稻瘟病的一种形式，发生在穗颈、穗轴和枝梗上，初期为暗褐色小斑点，后逐步呈环状或
上下扩展，因品种不同，病部分别呈现黄褐色、褐色或黑褐色。早期发病大多形成全白穗或局部白穗，
谷粒瘟是稻瘟病的一种形式，发生在谷壳和护颖上，早期发病，病斑呈椭圆形，较大，中央灰白色，
以后可逐渐扩展至整个谷粒，造成灰白色至暗灰色瘪粒。后期发病，多形成椭圆形或近圆形斑点，褐色
至红褐色，严重时谷粒不饱满，米粒变黑。
能够侵染水稻植株并引起病害的病原体。
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用医用注射器将一定量的接种体注射进水稻植株体内的接种方法。
3.6
3.7
3.8
对照品种
在人工接种鉴定时以全感水稻品种为对照。
抗病性
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。
病情指数
一种评价植物病害发生程度的综合性指标，包括植物病害的发病率与严重度。其中，发病率是指感
病样本数占调查总样本数的百分率，表示发病的普遍程度；严重度用分级法表示，即将发病的严重程度
由轻到重划分出若干个级别，分别用各级的代表值或百分率表示。
3.9
水稻品种
水稻品种包括对照品种和待测水稻材料。
3.10
产量损失率
一种评价植物受逆性条件影响后产量损失程度的指标，包括未发病植株产量和发病植株产量。以穗
为单位，产量损失率计算公式为：
A?(B?C)/B?100%...........................（1）
4
环境条件
鉴定时的环境条件，环境空气质量应符合GB3095规定；土壤环境质量应符合GB15618规定；农
田灌溉用水质量应符合GB5084规定。
选择易发病环境条件的较为中间的整块田块，有独立的进水口和排水口。在鉴定圃内种植对照和待
测材料。依据水稻材料的数量，在鉴定圃内布局若干个小区，小区内种植待测水稻材料，小区设置为2
行区，行距为30cm，株距为12cm，每行15蔸，单本插秧。根据试验目的，设置重复。
水稻种植全过程在常规管理的基础上，创造有利于稻瘟病发病的条件。不带药移栽，偏重施用氮肥
（一般情况下比生产用氮肥增加30%左右），生长过程中可防虫、除草，但不能施用任何杀菌剂。在水
稻生长的中后期，若发生倒伏，需及时地搭建竹架。
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5.3接种鉴定
5.3.1接种体制备
将稻瘟病菌接种在燕麦片番茄汁琼脂培养基上，于25℃-27℃条件下培养5d-7d，用无菌水轻轻洗
下菌丝（菌丝团要小）和分生孢子，将其悬浮液均匀涂于另一新的平板培养基上（培养基要适当硬一些），
每皿约400μl，超净工作台中吹干。置于25℃培养箱中培养约35-40h至培养基表面长出一层稀疏的气
生菌丝体。向菌落上加少量无菌水，用棉签轻轻擦去表面的气生菌丝，并用水将培养基表面的菌丝和分
生孢子清洗干净，待培养基表面晾干后罩上2层纱布，用皮筋绑好，于25℃光照条件下培养至有大量
分生孢子产生。从培养基上洗下分生孢子，离心（3000转/min），弃上清，沉淀下的分生孢子用0.025%
吐温20水溶液悬浮，血球计数板计数，孢子悬浮液浓度调至2×10个孢子/mL，可用混合菌株或单个
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菌株，供接种使用。
5.3.2接种方法
在水稻始穗期（稻穗抽出1/3左右）用医用注射器将合格的孢子悬浮液注入水稻穗苞中下部，接种
量为1mL/穗，依据试验所需