Wnt_β-catenin通路介导氟苯尼考抑制P19干细胞分化潜能的机制研究.pdf
本研究由
河南省高等学校重点科研项目（23A230013）
中国博士后科学基金面上项目（2019M652548）
提供资助
目录
目录I
英文缩略词表VII
摘要IX
ABSTRACTXIII
第一章文献综述1
1氟苯尼考的应用现状1
1.1氟苯尼考的理化性质1
1.2氟苯尼考的抗菌作用及机制1
1.3氟苯尼考的临床应用2
2氟苯尼考的毒副作用研究进展3
2.1氟苯尼考的药物不良反应及一般毒性3
2.2氟苯尼考的生态毒性4
2.3氟苯尼考的免疫毒性4
2.4氟苯尼考的胚胎毒性5
3蛋白质组学技术的应用5
3.1蛋白质组学5
3.2蛋白质组学技术6
3.3蛋白质组学技术在毒理学研究中的应用6
4Wnt信号通路在胚胎发育过程中发挥重要调控作用7
4.1Wnt信号通路简介7
4.2Wnt信号通路对胚胎发育及干细胞分化的调控作用8
5研究目的与意义9
第二章FLO致P19SCs线粒体损伤及氧化应激11
1试验材料11
1.1细胞来源11
1.2主要仪器11
1.3主要试剂12
1.4试剂配制12
2试验方法12
2.1细胞培养12
2.2iTRAQ蛋白质组学分析13
2.3Westernblot检测蛋白表达水平14
2.4透射电子显微镜观察17
2.5活性氧（ROS）检测17
2.6脂质氧化（MDA）检测18
2.7统计分析18
3试验结果18
3.1FLO染毒P19SCs中差异蛋白鉴定18
3.2差异表达蛋白的GO富集分析20
3.3差异表达蛋白的KEGG通路富集分析22
3.4蛋白质组学鉴定结果的验证23
3.5FLO致线粒体超微结构损伤24
3.6FLO诱导P19SCs活性氧水平升高25
3.7FLO诱导P19SCs发生脂质过氧化25
4讨论26
5小结27
第三章NAC改善FLO对P19SCs分化潜能的抑制作用29
1试验材料29
1.1细胞来源29
1.2主要仪器30
1.3主要试剂30
1.4试剂配制30
2试验方法30
2.1细胞培养30
2.2细胞形态学检测30
2.3细胞计数30
2.4活性氧（ROS）检测31
2.5脂质氧化（MDA）检测31
2.6P19SCs向心肌拟胚体的定向诱导分化31
2.7P19SCs向神经拟胚体的定向诱导分化32
2.8Westernblot检测蛋白表达水平32
2.9qRT-PCR检测基因转录水平33
2.10统计分析35
3试验结果36
3.1NAC改善FLO对P19SCs增殖的抑制作用36
3.2NAC缓解FLO所致P19SCs的氧化应激状态37
3.3NAC缓解FLO对P19SCs干性功能的抑制作用38
3.4NAC缓解FLO抑制P19SCs向心肌拟胚体分化的作用39
3.5NAC缓解FLO抑制P19SCs向神经拟胚体分化的作用40