番红砗磲中生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆鉴定及其光照反应机制探讨.docx
番红砗磲中生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆鉴定及其光照反应机制探讨
目录
番红砗磲中生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆鉴定及其光照反应机制探讨（1）
内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.1研究材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2基因克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2.1基因提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.2.2基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.2.3序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.3光照反应机制研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
2.3.1光照处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.3.2生物化学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
2.3.3生理学观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
3.1生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
3.1.1克隆成功与否的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
3.1.2基因序列特征分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
3.2基因表达与调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
3.2.1基因表达水平检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
3.2.2调控机制探讨．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
3.3光照反应机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
3.3.1光照诱导基因表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
3.3.2光周期影响下的生物钟调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
番红砗磲中生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆鉴定及其光照反应机制探讨（2）
研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
1.1番红砗磲的生物特性与生态作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
1.2生物钟基因在生物节律调控中的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
2.1实验材料与培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
2.2基因克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
2.3光照反应机制研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
2.3.1光周期实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
2.3.2光照响应信号检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
番红砗磲生物钟基因Cryptochrome和Period的克隆鉴定．．．．．．．45
3.1基因序列的比对与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
3.1.1