《血小板功能检测》课件.ppt
血小板功能检测
目录血小板基础知识血小板功能检测的意义检测方法
血小板基础知识定义血液中最小有形成分结构无核细胞，含多种功能区域功能止血、修复、炎症调节活化粘附、变形、释放、聚集
血小板的定义微小细胞碎片血液中最小的有形成分来源由巨核细胞产生数量正常范围：100-300×10^9/L
血小板的结构外膜系统与外界物质交换界面开放管道系统内陷膜系统，增大表面积致密小体存储ADP、钙等活性物质α颗粒含多种凝血因子和生长因子
血小板的功能止血形成血小板栓，阻止出血促进血管修复释放生长因子，促进组织再生参与炎症反应释放炎性介质，调节炎症过程免疫调节参与免疫识别，清除病原体
血小板活化过程1粘附血小板与血管内皮下胶原结合2形态变化从盘状变为不规则形，伸出伪足3释放反应释放α颗粒和致密颗粒内容物4聚集血小板之间相互聚集形成血栓
血小板功能检测的意义评估出血风险术前筛查，预防出血监测药物疗效指导抗血小板治疗方案调整诊断疾病鉴别血小板功能异常相关疾病预测血栓风险识别高危人群，实施预防措施
临床意义评估出血风险指导手术前准备和干预监测药物疗效评估抗血小板药物个体反应差异诊断功能障碍鉴别先天性或获得性血小板疾病预测血栓风险筛查心脑血管疾病高危人群
检测对象手术前患者评估出血风险，指导手术准备心脑血管疾病患者监测抗血小板药物疗效血液系统疾病患者诊断血小板功能异常抗血小板药物使用者筛查药物抵抗，优化个体化治疗
检测方法概述传统方法出血时间、血小板计数光学法光传输血小板聚集率测定电阻法全血血小板聚集测定流式细胞术检测血小板表面标志物血栓弹力图评估凝血整体功能
传统方法出血时间测定最古老的体外功能测定方法操作简便受多种因素影响灵敏度、特异性差血小板计数数量不等于功能自动血细胞分析仪仅反映数量无法评估功能状态
现代检测方法分类
光学法原理测量血浆透光度变化标本要求血小板富集血浆(PRP)诱导剂ADP、AA、胶原、肾上腺素等结果表达聚集曲线和最大聚集率
光传输血小板聚集率测定（LTA）1金标准血小板功能检测的参考方法2优势灵敏度高，可检测多种诱导剂3局限耗时，需要专业人员操作
诱导剂种类诱导剂作用途径常用浓度ADPP2Y1/P2Y12受体2-10μmol/L花生四烯酸环氧合酶途径0.5-1.0mmol/L胶原GPVI受体1-5μg/mL肾上腺素α2受体5-10μmol/L
LTA结果解读0-100%最大聚集率聚集程度的定量指标3-5分钟聚集时间达到最大聚集的时间1-2波聚集波数反映血小板释放反应情况
电阻法原理测量电极间电阻变化标本全血，更接近体内环境优势样本处理简单，结果更生理局限受血细胞比容影响较大
全血血小板聚集仪检测原理血小板聚集在电极表面导致电阻增加实时记录阻抗变化转化为聚集曲线仪器特点多通道并行检测5通道同时测定温度控制自动计算参数
电阻法检测参数
流式细胞术样本制备全血或PRP加入特异性荧光抗体激光检测细胞通过激光束产生散射光和荧光信号收集检测器收集并转换光信号数据分析软件分析血小板表面标志物表达
流式细胞术原理荧光标记特异性抗体识别血小板表面标志物1激光散射前向散射反映大小，侧向散射反映颗粒度2荧光检测不同波长检测不同标志物表达水平3定量分析计算阳性细胞百分比和荧光强度4
常用标志物CD62PP-选择素，α颗粒膜蛋白，活化标志PAC-1识别活化构象GPIIb/IIIa受体CD63致密颗粒膜蛋白，释放反应标志CD42bGPIb，血小板特异性标志
流式细胞术优势高通量短时间内分析大量细胞亚群分析区分不同功能状态血小板3高灵敏度检测微弱荧光信号
血栓弹力图（TEG）整体评估反映凝血系统全貌血小板功能凝血因子活性纤维蛋白功能纤溶系统活性检测过程连续记录血凝块形成过程中粘弹性变化加入激活剂测量旋转探针受力变化绘制TEG曲线
TEG原理1样本准备全血与激活剂混合2测量装置杯内旋转探针记录受力变化3信号转换机械信号转化为电信号再转为图形4曲线分析根据曲线形态评估凝血功能
TEG参数参数含义正常范围R值凝血反应时间5-10分钟K值凝血动力学1-3分钟角度α凝血速率53-72°MA值最大振幅50-70mmLY3030分钟溶解率0-8%
TEG临床应用围手术期监测指导输血和抗凝治疗创伤患者救治快速评估凝血状态2心血管疾病评估高凝状态肝功能衰竭监测凝血功能障碍
PFA-100血小板功能分析仪模拟体内环境高剪切力条件下血小板功能微孔膜胶原涂层肾上腺素/ADP操作简便全自动化流程抗凝全血样本快速出结果重复性好
PFA-100原理吸入全血样本通过毛细管高剪切力血流通过微小孔隙，模拟血管损伤3血小板活化接触胶原和激动剂后活化形成血栓血小板聚集直至完全堵塞孔隙
PFA-100参数84-160秒胶原/肾上腺素正常闭合时间范围68-121秒胶原/ADP正常闭合时间范围300秒