维生素含量测定方法.ppt

2，6一二氯靛酚法结果计算式中：X——样品中抗坏血酸含量，mg/100g；m——滴定时所取溶液中含有样品的质量，g；T——1mL染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量，mg/mL；V——滴定样液时消耗染料的体积，mL；V0——滴定空白时消耗染料的体积，mL。第15页，共23页，星期日，2025年，2月5日

2，6一二氯靛酚法注意事项（1）所有试剂最好用重蒸馏水配制。（2）样品采取后，应浸泡在已知量的2%乙二酸溶液中，以防止维生素C氧化损失。测定时整个操作过程要迅速，防止抗坏血酸被氧化。（3）若测动物性样品，需用10%三氯乙酸代替2%乙二酸溶液提取维生素C。（4）若样品滤液颜色较深，影响滴定终点观察，可加入白陶土脱色后再过滤。白陶土使用前应测定回收率。第16页，共23页，星期日，2025年，2月5日

2，6一二氯靛酚法注意事项（5）若样品中含有Fe2+、Sn2+、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等还原性杂质时，会使结果偏高；Cu2+可与抗坏血酸反应，也干扰测定。有无这些干扰离子可用以下方法检验：取样品提取液、偏磷酸-乙酸溶液各5mL混合均匀，加入0.05%亚甲基蓝水溶液2滴。如亚甲基蓝颜色在5~10s消失，即证明有干扰物存在；此检验对Sn2+无反应，可在另一份10mL的样品溶液中加入1：3盐酸溶液10mL，加0.05%靛胭脂红水溶液5滴，若颜色在5~10s消失；证明有Sn2+或其他干扰性物质存在。为消除上述杂质带来的误差，可采取以下测定方法：取10mL提取液两份，各加入0.1mL10%硫酸铜溶液，在110℃加热10min，冷却后在用染料滴定。有铜存在时，抗坏血酸完全被破坏，从样品滴定值中扣除校正值，即得抗坏血酸含量。第17页，共23页，星期日，2025年，2月5日关于维生素含量测定方法第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日摘要目前研究维生素C测定方法的报道较多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日关键词维生素C滴定法高效液相色谱法第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日概述维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日测定维生素C常用的方法有2,6-二氯靛酚滴定法、苯肼比色法、荧光法及高效液相色谱法等。2,6-二氯靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸，该法简便，也较灵敏，但特异性差，样品中的其他还原性物质会干扰测定，使测定值偏高，且对深色样液滴定终点不易辨别。苯肼比色法和荧光法测得的都是抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。高效液相色谱法可以同时测得抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的含量，具有干扰少、准确度高、重现性好、灵敏、简便、快速等优点，是上述几种方法中最先进、最可靠的方法。第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日维生素C的结构式维生素C：六碳的多羟基内酯第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日测定方法滴定法测定维生素C高效液相色谱法测定维生素C第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日原理染料2,6-二氯靛酚在酸性溶液中呈粉红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原型抗坏血酸还原后颜色消失。还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中还原型抗坏血酸含量成正比。1滴定法测定维生素C2，6一二氯靛酚法第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日

2，6一二氯靛酚法试剂1%的乙二酸溶液，2%的乙二酸溶液，1%淀粉溶液，6%碘化钾溶液。抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1%的乙二酸中，并稀释至100mL，置冰箱中保存。用时取出5mL，置于50mL容量瓶中，用1%乙二酸溶液定容，配成0.02mg/mL的标准溶液。标定：吸取此标准液5mL于三角瓶中，加入6%碘化钾溶液0.5mL，1%淀粉溶液3滴，以0.001mol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日

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