《核酸检测的质量控制》课件.ppt

核酸检测的质量控制专业系统讲解全流程质量管控

目录1核酸检测基础检测概述基本流程2质控体系重要性法规要求3三阶段质控检测前检测中检测后4特殊情况与展望应急检测

核酸检测概述定义与原理检测生物样本中特定核酸序列基于DNA/RNA互补配对原理应用领域传染病诊断肿瘤标志物检测遗传病筛查基因型分析

核酸检测的基本流程样本采集规范取样信息记录完整核酸提取裂解细胞/病毒纯化核酸扩增检测PCR等技术放大信号靶序列特异性扩增结果分析曲线判读数据解释

质量控制的重要性确保检测结果准确性减少技术误差提高诊断可靠性保障医疗决策基础防止假阳性和假阴性避免交叉污染防止抑制反应控制实验条件稳定建立实验室信誉数据可追溯结果可重复专业能力认可

质量控制的法规要求国家相关标准《医疗机构临床实验室管理办法》《医学实验室质量和能力认可准则》行业规范《分子诊断临床应用技术规范》《核酸扩增检验实验室工作指引》国际标准ISO15189医学实验室认证CAP认可要求

检测前质量控制：人员培训理论知识培训分子生物学基础检测原理掌握质控体系理解操作技能培训标准操作流程熟练仪器使用规范异常情况处理考核认证定期技能评估操作资质审核持续教育要求

检测前质量控制：设施要求功能区域规划严格分区防交叉污染气流控制合理气压梯度物理隔断独立实验区域单向工作流程样本处理路径管控

检测前质量控制：设备管理设备选择与验证性能参数评估定期维护预防性保养计划校准与检定关键参数定期校准性能监测运行状态记录

检测前质量控制：试剂管理试剂选择与验证性能指标评价批间差异分析储存条件控制温度湿度监测避光要求落实有效期管理先进先出原则过期销毁记录使用记录批号可追溯使用量监控

检测前质量控制：样本采集（1）采样时机选择最佳检测窗口期病原体载量高峰期治疗药物影响考量采样部位选择病原体优势分布区样本代表性保证不同疾病采样部位差异患者准备知情同意身份确认采样前禁忌告知

检测前质量控制：样本采集（2）100%标准化率采样技术规范统一实施30秒操作时间专业采样速度要求0交叉污染严格防护确保样本独立100%防护达标率个人防护装备完全符合要求

检测前质量控制：样本运输包装要求三层包装标准温度控制2-8℃冷链运输时间管理24小时内送达标识管理危险品标签清晰可见

检测前质量控制：样本接收1样本完整性检查外观无损坏量足质佳包装密封完好2信息核对样本标识与申请单一致采样时间确认运输条件记录3登记存储电子系统录入分区存放温度控制记录4不合格处理拒收标准明确异常记录完整及时沟通反馈

检测中质量控制：实验室环境监测项目标准要求监测频率温度20-25℃每日2次湿度40-60%每日2次气压差≥10Pa每日1次空气微粒万级洁净每月1次照明度≥300lx每季度

检测中质量控制：防污染措施物理分区试剂准备区样本处理区扩增分析区产物分析区单向流程人员单向流动样本单向传递物品专区存放消毒制度工作台紫外消毒环境表面擦拭定期空气消毒交叉污染控制专区专用物品核酸酶清除剂使用定期环境监测

检测中质量控制：核酸提取提取方法选择样本类型适配性检测要求匹配自动化程度考量提取效率评估回收率测定纯度分析完整性验证批内质控阴性对照样本阳性对照样本空白提取对照

检测中质量控制：扩增检测（1）仪器性能验证光源强度检查温度准确性验证均一性测试检测灵敏度评估反应体系优化引物探针浓度调整扩增程序优化复合扩增互不干扰特异性验证操作规范执行移液精准度控制防气溶胶污染模板添加顺序遵循反应管密封完全

检测中质量控制：扩增检测（2）循环数标准品样本A样本B

检测中质量控制：质控品设置（1）阴性质控监测污染情况每批次必设弱阳性质控监测灵敏度稳定性接近检出限浓度强阳性质控监测扩增效率系统稳定性验证

检测中质量控制：质控品设置（2）内部质控内参基因设置提取/扩增双重监控每管反应必含临界值明确界定外部质评第三方盲样测试实验室间比对定期参与国家室间质评结果分析持续改进

检测中质量控制：操作规范标准操作流程详细步骤文档化关键控制点重点环节监控操作记录实时记录可追溯复核制度关键步骤双人复核

检测后质量控制：结果判读判读标准制定阳性判定阈值扩增曲线形态要求内参基因范围规定异常结果处理灰区结果复检流程不一致结果仲裁机制假阳性/假阴性排查结果审核技术复核医学审核签发授权控制

检测后质量控制：数据分析Ct值变异系数检出率

检测后质量控制：报告管理报告格式规范统一模板设计必要信息项齐全结果表达标准化参考值明确标注报告审核制度多级审核机制技术审核+医学审核签发权限管理修改流程规范报告发放控制身份验证隐私保护及时性监控异常通报制度

检测后质量控制：档案管理原始记录保存操作记录完整留存电子数据备份多重备份冗余保护访问权限控制分级授权严格管理保存期限管理符合法规最低要求

检测后质量控制：实验室清洁日常消毒流程工作台75%酒精擦