高中生物选择性必修3同步系列(新教材)讲义:第2章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体.pdf
第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体
一、动物细胞融合技术
1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理:细胞膜的流动性。
3.诱导融合的方法Error!
4.意义:细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
5.应用
(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制造单克隆抗体。
(1)动物细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优越性在于能定向地改造生物的性状()
(2)动物细胞融合的目的中最重要的是培育生物新品种()
答案(1)×(2)×
请进行动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比,并完善下表。
比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合
原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性
细胞融合用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后用胰蛋白酶使细胞分散后,诱导细
方法诱导原生质体融合胞融合
聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—PEG融合法、电融合法、灭活病毒
诱导手段
高pH融合法、电融合法、离心法诱导法
结果形成杂种植株形成杂交细胞,以生产细胞产品
打破生殖隔离实现远缘杂交育种,研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、
用途
扩展杂交亲本范围,培育新品种培育生物新品种、制备单克隆抗体
意义突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗
体。
(2)缺陷:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备
(1)制备原理
①B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外不能(填
“能”或“不能”)无限增殖。
②骨髓瘤细胞特点:能无限增殖。
③杂交瘤细胞特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能大量增殖,又能
产生足够数量特定抗体。
(2)制备过程
制备特异性B淋巴细胞Error!
⇓
获得杂交瘤细胞Error!
⇓
克隆化培养和抗体检测
⇓
将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖
⇓
提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠腹水中提取
(3)单克隆抗体优点:特异性强、灵敏度高、并可大量制备。
(4)单克隆抗体的应用
①作为诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。例如利用同位素或荧
光标记的单克隆抗体在特定组织中成像的技术,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
②用于治疗疾病和运载药物。
(1)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性()
(2)制备单克隆抗体时,要选用已免疫B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞()
答案(1)×(2)√
1.制备单克隆抗体的过程中进行第一次筛选的原因:诱导融合后会得到多种杂交细胞,另
外还有未融合的细胞。
第一次筛选的方法:利用选择培养基进行筛选。
第一次筛选的目的:得到杂交瘤细胞。
2.制备单克隆抗体的过程中进行第二次筛选的原因:从小鼠体内提取B淋巴细胞有很多
种,形成杂交瘤细胞也有很多种。
第二次筛选的方法:专一抗体检测。
第二次筛选的目的:得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
1.动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇(PEG)法、灭活病毒诱导法、电融合法。
3.动物细胞融合技术的主要用途是制备单克隆抗体。
4.杂交瘤细胞是由经免疫B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的