吸光光度法简介2.ppt

AnalyticalChemistry6.3吸光光度法的靈敏度與準確度6.3.1靈敏度的表示方法6.3.2影響靈敏度的因素6.3.3測量條件的選擇6.4吸光光度法分析條件的選擇6.4.1酸度的選擇6.4.2顯色劑用量的選擇6.4.3其他條件的選擇6.5吸光光度法應用簡介6.5.1微量組分的測定6.5.2示差光度法6.5.3光度滴定法6.5.4絡合物組成及穩定常數的測定6.5.5弱酸弱鹼離解常數的測定6.5.6雙波長分光光度法6.5.7導數分光光度法6.3吸光光度法的靈敏度與準確度靈敏度吸光光度法是一種適合於微量組分測定的儀器分析法，檢測限大多可達10-3~10-4g/L或~?g/mL數量級。準確度能滿足微量組分測定的要求。一般相對誤差2~5%。例如，石灰石中微量鐵，含量為0.067%，相對誤差以5%計算，結果為0.064~0.070%，絕對誤差為0.003%比較常量分析：鐵礦中的鐵含量測定，含量為80%，若相對誤差以5%計算，結果為84~76%，絕對誤差為4%實際測得的是條件摩爾吸收係數，?′對摩爾吸光係數的理解之一332+桔紅色?508鄰二氮菲?=1.1?104實際測定摩爾吸光係數是對吸光物質而言，是由吸光物質的結構特徵，吸光面積等因素決定。靈敏度的表示方法摩爾吸光係數?當b=1時，A=?CAC0?對摩爾吸光係數的理解之二對同一種待測物質，不同的方法具有不同的?，表明具有不同的靈敏度。例，分光光度法測銅銅試劑法測Cu?426=1.28?104L．mol-1．cm-1雙硫腙法測Cu?495=1.58?105L．mol-1．cm-1一般情況?104?~104~105?105低靈敏度中等靈敏度高靈敏度吸光係數a比吸光係數Sandell靈敏度SS值表示光程（pathlenth)為1cm吸收池測得吸光度為0.001時，每mL溶液中待測物質的微克數。單位為?g．cm-2。Sandell靈敏度與?的關係摩爾吸光係數?靈敏度靈敏度影響準確度的因素1、儀器測量誤差根據誤差傳遞公式，可以推導出濃度測量的相對偏差為T=0.368=36.8%A=0.434為了減少測量誤差，控制溶液的吸光度A=0.15~1T=70~10%誤差公式推導0.368儀器測量誤差公式推導吸光定律根據誤差傳遞公式，有又得濃度測量的相對偏差令得T=0.368=36.8%A=0.434此時，儀器測量誤差最小為了減少測量誤差，控制溶液的吸光度A=0.15~1T=70~10%2、化學反應的影響M+L=ML?max吸光定律光度法測定通常在一個較大的濃度範圍內作工作曲線，當?′或隨著濃度的變化而變化，或隨著副反應的變化而變化時，就表現出對吸光定律的偏離。實際計算例：M+L→ML,ML2,ML3?1?1?2?2?3?3如果在?1進行測定，結果如左圖所示AC(M)?AMLML2ML3?1ML3ML2ML例，聚合引起的對吸光定律的偏離單體：2?max=660nm二聚體：?max=610nmAC?max=660nmA?660nm610nm測量條件的選擇測量波長的選擇無干擾，選擇?max有干擾A?A?待測溶液吸光度的選擇控制A=0.15~1T=70%~10%方法選擇C選擇b1、非單色光影響小2、靈敏度高參比液的選擇原則：扣除非待測組分的吸收以顯色反應為例進行討論M+R=M-R?max試液 顯色劑溶劑吸光物質參比液組成無吸收無吸收光學透明溶劑基質吸收無吸收吸收不加顯色劑的試液無吸收吸收吸收顯色劑基質吸收吸收吸收吸收顯色劑+試液+待測組分的掩蔽劑若欲測M-R的吸收?maxA（樣）=A（待測吸光物質）+A（干擾）+A（池）A（參比）=A（干擾）+A（池）6.4吸光光度法分析條件的選擇顯色