生物化学-第三章核酸化学幻灯片.ppt

第三章 核酸化学;1. 核酸的化学组成结构及其性质 2. 核酸的测定方法 3. 核酸的研究技术;1868年，F. Miescher从细胞核中分离得到一种酸性物质，即现在被称为核酸的物质。;核酸的种类和分布;;核酸的功能;第一节 核酸的组成成分;;（二）、碱基;;(三)、核苷（nucleoside）;腺嘌呤脱氧核苷;（四）、核苷酸（nucleotide）;（五）.核苷酸衍生物;核酸中也存在一些不常见的稀有碱基。稀有碱基的种类很多，大部分是上述碱基的甲基化产物。;5;;4.肌苷酸及鸟苷酸(强力味精);第二节、RNA的分子结构;;5′PdAPdCPdGPdTOH 3′ 5′PAPCPGPUOH ′ 或5′ACGTGCGT 3′ 5′ACGUAUGU 3′ ACGTGCGT ACGUAUGU;(二)、RNA的降解;2.酶法降解;（一）RNA的二级结构;（二）tRNA的三级结构;;第三节 DNA的分子结构;ATGCTG;2.双脱氧法;3.化学修饰法;被测定链的5’ 3’;二.DNA的二级结构;;; ;（五）.绞链DNA（hing-DNA 即H-DNA;;三、DNA的三级结构;连环数（linking number）：在双螺旋DNA中，一条链以右手螺旋 绕另一条链缠绕的次数.以“L”表示。;第四节 核酸及核苷酸的性质;二.两性性质;4.尿嘧啶 胸腺嘧啶;;三、核酸的紫外吸收特性;四、核酸的变性与复性;;热变性和Tm :;（二）. 核酸的复性;（三）. 核酸的复性与分子杂交;第五节 核酸及其组分的分离纯化与测定; 破细胞（1mol/LNaCL） 离心去沉淀（含RNA-Pr） 上清（含DNA-Pr） SDS法/酚法（去蛋白） 离心去沉淀（变性蛋白） 上清（含DNA） 乙醇沉淀 离心收集沉淀（DNA） ;1.离子交换法：;2.凝胶过滤法:; ;（二）. 核酸纯度的测定;凝胶电泳;第六节核酸研究的常用技术;二.印迹技术与分子杂交;;;（二）.核酸杂交;;;点杂交;三.PCR技术-DNA Polymerase Chain Reaction;（二）PCR技术的应用;（三） PCR技术的特点