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项目三 卵磷脂的制备 -预习方案.pptx

发布:2017-05-27约1.41千字共19页下载文档
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项目三 卵磷脂的制备 预习方案;目录;基础知识;卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。1844年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂(蛋黄素),也自此揭开了其神秘的面纱。卵磷脂是生命的基础物质,人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。 ;主要来源; 主要功能;实训步骤;2.卵磷脂溶于乙醇,不溶于丙酮,因此可以利用乙醇从蛋黄中提取粗卵磷脂,而甘油三酯、甾纯溶于丙酮,所以可用丙酮将卵磷脂从粗卵磷脂中沉淀出来,得到精卵磷脂。因为卵磷脂能与锌等二价中金属离子反应生成络合物,因此可利用金属盐将卵磷脂从溶液中提取出来,后再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质,从而提高卵磷脂的纯度。(有机溶剂提取法);三、生产工艺 (一)卵磷脂的提取工艺流程: 鸡蛋黄 上清液 油状物 沉淀 精制卵磷脂 沉淀 溶解液;实际操作步骤如下: 1、粗提: (1)室温下,取适量鸡蛋黄,用2倍于卵黄体积的95%乙醇进行提取,混合搅拌。 (2)以3000rpm 离心5min。 (3)将沉淀物重复提取三次,回收上清液。 (4)45℃减压蒸馏至近干,用少量的石油醚洗下粘壁的黄色油状物质。 (5)加入丙酮,抽滤,分离出沉淀物。 (6)40℃在真空干燥30min,得到淡黄色的粗卵磷脂,称重。 ;2、精制: (1)取一定量的卵磷脂粗品,用无水乙醇溶解,得到约10%的乙醇粗提液。 (2)加入相当于卵磷脂质量的10%的ZnCL2水溶液,室温搅拌0.5h,分离沉淀物。 (3)加入适量冰丙酮(4℃)洗涤,搅拌1h。 (4)用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无色为止,得到白色蜡状的精卵磷脂,干燥,称重。;(二)卵磷脂的鉴定——薄层层析法 1、实训所需原料、试剂、仪器: 原料:提取的卵磷脂 试剂:硅胶-G、0.2%羧甲基纤维素钠溶液、展层剂:氯仿:甲醇:水(65:25:4)、显色剂:1%碘液 2、实训步骤: (1)调浆:称取硅胶-G4.5g 烧杯 12mL 0.2%羧甲基纤维素钠溶液 用玻璃棒调匀搅拌为浆状液。 (2)涂布:取洁净、干燥??璃板一块 下衬一张白纸 在桌面上放平,保持均匀一致,涂布面积1~4/5。 (3)干燥:在室温下凉干2min,活化30min后,关闭电源,当玻璃板面温度降至不烫手时取出。 (4)活化:当干燥箱升温至不烫手时取出。;(5)点样:样点距离玻璃板一端下缘1cm,相互间隔1~1.2cm;每位点重复点五次,每次用冷风吹干后再点,每次点样直径不超过2mm。 (6)展层:在层析缸中加入展层剂0.5cm深,加盖平衡30min,将点样端浸入,密闭展层10~30min。后取出薄层板,标出展层剂前沿位置,用电吹风热风将薄层板吹干。 (7)显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶液,热风吹干至色斑出现。 ;薄层层析法;卵磷脂成分的检测;卵磷脂成分的检测;注意事项;参考文献;谢谢观看
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