实训四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备.ppt

实验四 液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备 一、目的 1、掌握各类培养基制备方法及注意事项； 2、掌握各类培养基的主要成分及各成分含量。 二、内容 1、液体培养基 1.2组－200ml； 2、半固体培养基 3.4组－200ml； 3、斜面培养基（固体） 5.6组－200ml； 4、固体培养基 1~6组－400ml。 三、步骤 1、称量 （注意：3～5g应取5g；称量后瓶塞盖好，防止粉剂潮解；称量要准确，熟练使用砝码天平）； 2、溶化 电炉100℃充分完全溶化（注意：溶化前记号笔画好水线作标记；反复4～5次沸腾达到完全溶化，看不到大的颗粒物质，呈澄清透明状态）； 3、调整pH到7.4 培养基若偏酸，加入1d NaOH，若偏碱，加入1d HCl；pH试纸滴加试样后立即观察，不可长时间等待； 4、分装 液体、半固体和固体培养基需要先分装入试管后高压灭菌，量约在试管1/3高度为准，选好合适的塞子塞好，塞子大小要合适，忌大忌小。 5、高压灭菌 15磅20min（15磅压力下温度为121.3℃）； 6、倒板 固体培养基高压灭菌后倒板，严格遵守无菌操作技术操作，防止培养基被污染； 7、鉴定 37℃24h，如培养后随即选中平板无细菌生长则实验成功； 8、保存 4℃冰箱保存。 四、各培养基成分 1、液体培养基（肉膏汤） 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水1000ml； 2、半固体培养基 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，0.3～0.5％琼脂粉，蒸馏水1000ml 3、斜面培养基 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，2～3％琼脂粉，蒸馏水1000ml； 4、固体培养基（营养琼脂或普通琼脂） 成分：牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，2～3％琼脂粉（20～25g较好），蒸馏水1000ml； 5、血液琼脂（血平板） 成分：普通琼脂100ml，加入无菌脱纤维羊血8～10％。 五、小结 本次实验重点在于称量和无菌操作倒板，故同学需要保持严谨、认真的态度。 * *