[中学联盟]福建省寿宁县第一中学高中生物选修三：1.1DNA重组技术的基本工具.ppt

注：限制性酶是一大类酶，不是一种酶。 限制酶大多可以专一性识别双链DNA分子上的某种特定核苷酸序列， 限制酶所识别的序列，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线 粘质沙雷氏杆菌 3.1.1DNA重组技术 的基本工具 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 重组DNA 导入 形成 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 限制性核酸内切酶 粘性末端 平末端 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶EcoRΙ能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 EcoRΙ EcoRΙ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 G A A T T C C T T A A G EcoRⅠ 中轴线 C C C G G G G G G C C C SmaⅠ 黏性末端　　　　 平末 端　　　平末端 黏性末端 　　　　 人类对转基因技术的担心之一就是异种生物的DNA进入体内，会不会发生这种情况？ 原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉，使之失效。 单细胞没有这么复杂的系统，很容易受到自然界中外源DNA的入侵，但它却能长期稳定存在，为啥？ 为什么不会把自己的DNA切掉？ 1、不含有此种限制酶的识别序列。 2、通过甲基化将这个序列保护起来了。 DNA连接酶： E.coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 G P A P T4DNA连接酶 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 3、运载体 作用：将目的基因导入受体细胞 常用运载体：①质粒、②动植物病毒、③噬菌体 注：限制性酶是一大类酶，不是一种酶。 限制酶大多可以专一性识别双链DNA分子上的某种特定核苷酸序列， 限制酶所识别的序列，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线 粘质沙雷氏杆菌 * *