固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定双壳贝类中扇贝毒素和原多甲藻酸.pdf

· 2316· 中国卫生检验杂志 2014年8月第24卷第 16期 ChinJHealthLabTec，Aug2014，Vol24，No16 · 化学测定方法 · 固相萃取 一高效液相色谱 一串联质谱法测定 双壳贝类 中扇贝毒素和原多甲藻酸 方兰云，姚浔平，王立，李继革 宁波市疾病预防控制中心 宁波市毒物研究与控制重点实验室，浙江 宁波 315010 ， 摘要：目的 建立一种超灵敏、高效、准确并能同时测定双壳贝类中扇贝毒素和原多甲藻酸的固相萃取 一高效液相色 谱一串联质谱 (SPE—HPLC／MS／MS)分析方法。方法 样品经甲醇三次提取 ，提取液过 OasisHLB固相萃取小柱 ，所得 滤液采用反相 C。柱作为色谱分离柱，含甲酸和乙酸铵的乙腈水作为流动相 ，梯度洗脱方式分离待测化合物。优化了固 相萃取的上样、淋洗及洗脱条件，考察了粗提取液及过固相萃取小柱提取液的基质效应。结果 过固相萃取小柱提取 液的基质抑制效应抵消了一部分因浓缩而提高的灵敏度。基质抑制效应不与SPE浓缩倍数成正 比，浓缩倍数2即可 提高方法灵 敏度。由此得到方法 线性范 围为 0．86ns／ml～55．2ng／ml及 0．128ng／ml～8．2ns／ml，检 出限为 0．013 g／kg～0．085 g／kg，精密度低于7％，回收率为99％ ～101％。结论 本方法适用于双壳贝类 中PTX2和AZA2 的同时测定。 关键词：固相萃取；高效液相色谱 串联质谱 ；扇贝毒素；原多甲藻酸；双壳类 中图分类号：0657．63 文献标识码 ：A 文章编号：1004—8685(2014)16—2316—05 Detection ofoectenotoxinsand azaspiracid一2 inbivalve molluscsbysolid-—phaseextraction-·highperformance liquidchromatographytandem massspectrometry FANGLan—yun，YA0Xun—ping，WANGLi，LIJi—ge NingboKeyLaboratoryofPosionResearchandControl，NingboMunicipalCenter -厂0rDiseaseControland Prevention，Ningbo315010，China Abstract：Objective Aultra—sensitive，high—performanceandprecisemethodforsimultaneousdetemrinationofazaspiracid 一 2(AZA2)andpectenotoxins(PTX)inbivalveswasestablishedbyhighperformanceliquidchromatographytandem mass spectrometry(HPLC／MS／MS)basedonsolidphaseextraction(SPE)．Methods Afterthree—timeextractionbymethanol， thesampleextractWaSloadedonanOasisHLB SPEcolumn．Separationofthetargetcompoundwasachievedonareversed— phaseCl8columnwithaeetonitrile—watercontainingfomr icacidna dammonium acetateasmobilephaseforrgadientelution． Thesampleloading，washingandelutionconditionsofS