【2017年整理】HPLC分析方法的建立与开发.ppt

利用文献的数据进行对比和定性分析 注意HPLC的柱填充技术的复杂性，定性受到限制 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 改变选择性∶α 通过改变流动相组成改变选择性 同样强度的不同溶剂 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 固定相优化：改变色谱柱 0 2 4 6 8 10 12 0 2 4 6 8 10 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 4 5 6 7 8 9 10 3 C-18 C-8 Optimization Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 10种巴比妥药物的分离（等梯度） 保留时间 (min) 3.14 相对吸光度 4.55 5.74 6.44 7.11 7.74 10.76 11.79 12.63 1 巴比妥 2 阿洛巴比妥 3 阿普比妥 4 苯巴比妥 5 异丁比妥 6 环戊巴比妥 7 布他比妥 8 海索比妥 9 异戊巴比妥 10 甲苯比妥 25% 乙腈 1 2 4 5 6 7 8 9 10 11 12 3 13 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 优化流动相 - 困难的分离 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 20 40 60 80 100 0 20 10 40 30 50 60 70 80 90 100 乙腈/水 甲醇/ 水 四氢呋喃/水 甲醇 1 4 6 7 2 5 3 四氢 呋喃 乙腈 1.从甲醇/水开始，优化溶剂组成以使所有色谱峰在合理的 k 范围流出. 2.选择洗脱强度相等的乙腈/水混合流动相进行下一次分析. 3.用四氢呋喃/水流动相重复分析4.按比例混合等强度流动相再进行进样分析 优化 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三种流动相的比较 25% 乙腈 35% 甲醇 21% 异丙醇 洗脱顺序 选择性 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 离子型化合物的分离方式 使用离子交换柱∶离子交换法 主要用于“强”阴、阳离子 使用反相柱 通过改变流动相的pH值，使样品成中性 加入“对离子”，使样品呈中性 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 离子型化合物在反相色谱柱上不保留 改变流动相的pH值，抑制样品离子的电离 适用于弱酸性化合物的分离 降低流动相的pH值，使样品降低离子化 使用硅胶基质C18填料 使用条件应在填料基质的范围内 硅胶柱的pH在2-8内 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 如果： 一些酸在pH低于2时还保持离子化 一些碱在pH高于7时还保持离子化 可以有以下的选择 离子交换色谱 使用聚合物反相柱，在pH高于7时用离子抑制法 使用“离子对色谱法” Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Co