第九章生物技术药物要点.ppt

* 2 体外药效学法 利用体外细胞与活性蛋白质多肽的特异生物学反应，通过剂量（或浓度）效应曲线进行定量。此外也可采用SDS－PAGE测定蛋白质类药物的活性。 3 体内药效学法 将药物给予动物或人体后反映出的药效学反应。 * 三 制剂中药物的体外释药速度的测定及影响药物释放行为的因素 1 蛋白质药物的体外释药速率的测定方法 需考虑药物在溶出介质中的不稳定性，多采用测定制剂中未释放药物量的方法。 2 影响药物释放行为的因素 以控释微球为例，影响因素主要集中在聚合物、药物、制备工艺和附加剂等几个方面。 * 四 制剂稳定性的研究 物理稳定性：药物的溶解度、释放速率及药典规定的制剂常规指标的测定。 化学稳定性：药物的聚集稳定性、降解稳定性和生物活性稳定性。 * 五 体内药动学研究 由于蛋白质类药物剂量小，体内血药浓度检测灵敏度要求高，常规检测方法不能满足体内血药浓度的测定，此外药物进入体内后很快被分解代谢，因此选择合适的检测方法是进行体内药动学研究的关键。 非静脉给药的缓控释制剂可考虑放射标记法测定血药浓度。 血药浓度与药效学呈线性关系，可用药效学指标代替血药浓度进行体内吸收和药动学研究。 * 六 刺激性及生物相容性研究 皮肤、黏膜及各类腔道用药需进行局部毒性和刺激性试验。 各类注射（植入）途径给药制剂除局部毒性和刺激性试验外还需进行辅料的生物相容性研究。 * 蛋白质稳定的机理之一是优先作用原理，即在有起稳定作用的保护剂存在的条件下，细胞膜蛋白优先与水作用(优先水合)，而保护剂优先被排斥在蛋白质区域外(优先排斥)，在这种情况下，膜蛋白表面就比其内部有较多的水分子和较少的保护剂分子。但是优先作用机理不能完全解释用聚合物或高浓度蛋白质自身作为保护剂保护蛋白质的现象，在冻干过程中，由于蛋白质的水合层被除去，优先作用机理不再适用。对于保护机理仍在探索阶段，目前主要有两种假说。多学者认为，由于蛋白质分子中存在大量氢键，结合水通过氢键与蛋白质分子联结。当蛋白质在冷冻干燥过程中失去水分后，保护剂的羟基能替代蛋白质表面的水的羟基，使蛋白质表面形成一层假定的水化膜，可保护氢键的联结位置不能直接暴露在周围的环境中，从而稳定蛋白质的高级结构，防止蛋白质冻干而变性，使其即使在低温冷冻和干燥失水的情况下，仍保持蛋白质结构与功能的完整性。丙三醇-水混合溶剂的氢键形成能 力下降, 有利于蛋白质疏水基团的聚集和形成紧密构 象, 而溶剂体系氢键网络的崩溃将使得蛋白质分子产生 进一步的折叠. * 丙三醇的加入降低了介质的氢键形成能力, 使 得原来分布于蛋白质分子表面的疏水基团可以迁移到 蛋白质分子内部, 降低与丙三醇和水分子的排斥作用, 将引起蛋白质分子溶剂化数的增加; 同时, 蛋白质溶剂 化层中丙三醇的比例随着蛋白质极性的增大而增加, 丙 三醇分子可以通过与亲水基团相结合而积聚在蛋白质 表面[17]. * * PVA溶于水，水温越高则溶解度越大，但几乎不溶于有机溶剂。PVA溶解性随醇解度和聚合度而变化。部分醇解和低聚合度的PVA溶解极快，而完 * E-TRANSreg; ：为离子导入型透皮系统 * 碘化反应过程中产生一种具有强氧化性的带正电荷的碘原子对 酪氨酸酚环上与负氧(羟基)邻位的碳进行亲,电攻击， 或对组胺酸咪唑环上与负氮邻位的碳进 行亲电攻击，产生取代反应而碘化多肽或蛋白质.这种取代反应在某些情况下可以在组胺酰 咪唑基或半胱胺酰巯基上，对于非肽类激素,如甾体激素 A 环第二位的氢也可进行取代。 反 * 2、低温喷雾提取法 将生物大分子药物与保护剂的均匀粉末加至生物可降解性聚合物的有机溶剂（如二氯甲烷）中混合形成混悬液，将此混悬液经喷头雾化后喷入冰冻的乙醇溶液（该溶液可与上述溶液混溶，但聚合物不溶于此溶液），在低温（-70℃）状态下，聚合物载体中的有机溶剂在乙醇中不断扩散完全，分离微球，低温干燥除去乙醇得粉末状微球。 该方法的特点：包封率高，微球粒径集中，工艺稳定，可实现产业化，但其活性损失较复乳液中干燥法大。 * 3、喷雾干燥法 将生物大分子药物及其稳定剂的混合粉末（或水溶液）与溶有高分子聚合物的有机溶液混合形成混悬液（或乳浊液），将此混悬液（或乳浊液）经喷嘴雾化干燥制得微球。 * 4、超临界萃取法 超临界流体既具有对溶质有较大溶解度的特点，又具有气体易于扩散和运动的特点。 在制备微粒中根据聚合物及药物的溶解特性又分为超临界溶液快速膨胀（rapid expansion of supercritical solution，RESS）技术和气体反溶剂（gas antisolution,GAS）技术。 * RESS技术 RESS技术是将固体物质在一定的温度和压力下溶解在超临界流体中形成溶液，然后将此高压溶液从一个细小的喷嘴(