SN_T 5120-2019进出口食用动物、饲料中亚硝酸盐测定 比色法和离子色谱法.pdf

ICS 01.040.65B 41SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5120—2019进出口食用动物、饲料中亚硝酸盐测定比色法和离子色谱法Determination of nitrite in edible animals and feeds for import and export-Colorimetric analysis and ion chromatography2019-09-03发布2020-03-01实施中国海南出版社有限公司中华人民共和国海关总署发布HG944440002166盛活网刮开涂层激活密码 SN/T 5120-2019前言本标准按照GB/T1.1---2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳海关、深圳市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：杨俊兴、王丙涛、孙洁、刘建利、张彩虹、涂小珂、林彦星、吕建强、花群义、秦智锋。1 SN/T 5120—2019进出口食用动物、饲料中亚硝酸盐测定比色法和离子色谱法1范围本标准规定了进出口食用动物、饲料中亚硝酸盐的测定方法。本标准适用于进出口食用动物、饲料中亚硝酸盐的测定，本标准的方法检出限：比色法为 0.5 mg/kg(或 mg/I)；离子色谱法为 0.1 mg/kg(或 mg/L）。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1　饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3比色法3.1原理在弱碱性条件下去除样品中的蛋白质、脂肪等，亚硝酸盐和对氨基苯磺酸在弱酸性条件下反应，生成重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色深度与亚硝酸盐含量成正比，比色法定量。3.2试剂除非另有说明，所用试剂均为优级纯，实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。3.2.1无水对氨基苯磺酸(CHzNO:S)。3.2.2盐酸萘乙二胺(Ci2 H14 N²·2HCl)。3.2.3²氯化铵缓冲液：取500mL水，加25mL盐酸和60mL氨水至1000mL容量瓶中，混匀，定容至1 000mL,调节 pH值至 9.6～9.7。3.2.4氢氧化钠溶液（20g/L）：称取20.0g氢氧化钠，用水溶解，定容至1000mL。3.2.5乙酸锌溶液（220g/L）：称取110.0g乙酸锌，加15mL冰乙酸溶解，用水稀释至500mL。3.2.6对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取4.0g无水对氨基苯磺酸(3.2.1）,加300 mL热水溶解,加200 mL冰乙酸，稀释至 1000 mL，放于棕色瓶避光保存。3.2.7盐酸萘乙二胺溶液(1 g/L)：称取 1.0g盐酸萘乙二胺(3.2.2）,加水溶解,稀释至 1000mL，放于棕色瓶避光保存。3.2.8亚硝酸盐标准储备液(1000 mg/L):购买国家标准溶液;或者准确称取 0.150 g于110℃～120℃干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解，转移至 100 mL容量瓶中，定容至刻度,摇匀，避光保存。3.2.9亚硝酸盐标准工作液（10.0mg/L)：使用前，准确吸取亚硝酸盐标准储备液（3.2.8)1.0mL于1 SN/T 5120—2019100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。3.3仪器3.3.1分光光度计3.3.2分析天平：感量0.0001g。3.3.3恒温水浴锅。3.3.4涡旋混合器。3.4分析步骤3.4.1试样制备饲料：按照GB/T14699.1采集代表性样品，按照GB/T20195制备饲料试样供实验室检测使用。血液:采集动物血液 10 mL，室温静置约 30 min，使血液自然凝固。必要时，5 000 r/min离心10 min,收集上清液转移至另一离心管中备用。尿液：取动物新鲜尿液50mL，混匀，5000r/min离心10min后取上清液备用。3.4.2提取净化粗饲料：称取3g～5g试样（精确至0.01g)，置于100mL具塞比色管中，加60mL水，涡旋混匀，置于70℃水浴中加热15 min,取出冷却,转移至100 mL容量瓶中，定容，静置15min，过滤,弃去初滤液25mL，收集备用。配合饲料、鱼粉、酵母蛋白等：称取3g～5g匀质试样（精确至0.01g），置于100mL具塞比色管中，加60mL水混匀，加人2.0mL氢氧化钠溶液（3.2.4），置于70℃水浴中加热15min，取出冷却，转移至100mL容量瓶中，加8.0mL乙酸锌溶液(3.2.5)混匀以沉淀蛋白，定容，静置15min，除去上层脂肪，过滤，弃去初滤液25mL，收集备用。血液、尿样：准确吸取2.0mL匀质试样，