实验室环境及人体体表微生物的检测.pdf

实验室环境及人体体表微生物的检测 （李玲艳张海满 薛汝峰 解制怡 申传斌等） 要：高校越来越重视对学生实践能力的培养，学生在实验室的时 间和机会越来越多。然而微生物实验室不同于其他学科实验室，所面 对的是一个个活的生物，而且具有不同程度的感染性。本实验项目的 意义在于使学生从感官上认识自身周围存在的微生物，掌握微生物的 分离、接种技术。对实验中富集的微生物采取灭菌处理，做到微生物 实验室安全管理工作标准化和规 化。 关键词：实验室;微生物;计数 1 料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 材料 原料：马铃薯（市购）琼脂；NaOH （分析纯） 天津市凯通化学 试剂有限公司；牛肉浸膏 天津市英博生化试剂有限公司；蛋白胨 天津市凯通化学试剂有限公司；蔗糖（分析纯）上海国药集团化学试 剂有限公司 1.1.2 主要仪器设备和试剂 1.1.2.1 主要仪器设备 压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电子天平、恒温培养箱、电热恒 温鼓风干燥箱、霉菌培养箱、超声波清洗器、移液器、震荡培养箱、 体视显微镜等。培养基平板，无菌水，灭菌棉签 （装在试管内），接 种环，试管架，酒精灯，酒精瓶，记号笔，废物缸，牙签等。 1.1.2.2 试剂 碘液、二甲苯、95% 乙醇、香柏油、美蓝、结晶紫、石炭酸复红、 番红、孔雀绿、棉蓝等 1.1.3 分离计数培养基 马铃薯培养基(PDA)配比为：马铃薯200 g、蔗糖20 g、琼脂20 g、水 1000 ml。牛肉膏蛋白胨培养基配比为：牛肉膏 3 g、蛋白胨 10 g、NaC l 5g、琼脂20 g、水1000 ml。 1.1.4 本实验分别进行了以下几方面的研究：实验室门、实验室窗 微生物检测；学生自身微生物检测 （手，头发、皮肤、唾液等）；室 内空气中微生物的检测；富集微生物的处理。 1.1.4.1 运用垂直落下法测空气中微生物浓度。 将装有牛肉膏蛋白胨培养基的平皿敞口放于空气中放置 1 小时， 然后将其放于恒温培养箱中培养24-72 小时并计数。 1.1.4.2 稀释平板培养计数法。 将桌面上 4 平方厘米左右面积用灭菌棉签涂抹后运用稀释平板 涂布法接种在牛肉膏蛋白胨培养基中，并于 37℃下在恒温培养箱中 培养 24-72 小时并计数。门以及人体表面微生物计数也采取这种方 法。 1.1.4.3 菌落形态初步判断法。 1.1.4.4 显微观察形态和结构,分类鉴定。 1.1.4.5 将富集得到的微生物平板放于水中煮沸处理30 min，以杀 灭其中的微生物。 2 结果与分析 2.1 各 验室微生物检测 147 实验室： 敞口平皿在空气中放置 1 小时后平均分布细菌73 个。 实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2000 个。 实验台:1平方厘米面积平均分布细菌1540 个。 149 实验室： 敞口平皿在空气中放置 1 小时后平均分布细菌70 个。 实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2058 个。 实验台:1平方厘米面积平均分布细菌2710 个。 151 实验室: 敞口平皿在空气中放置 1 小时后平均分布细菌93 个。 实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2006 个。 实验台:1平方厘米面积平均分布细菌3050 个。 140 实验室： 敞口平皿在空气中放置 1 小时内细菌：21 个。 实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌1891 个。 试验台:1平方厘米面积平均分布细菌2440 个。 人体表面微生物检测 手指表面1 平方厘米面积平均分布细菌554 个。 手心表面1 平方厘米面积平均分布细菌203 个。 手背表面1 平方厘米面积平均分布细菌681 个。 衣袖口表面1 平方厘米面积平均分布细菌761 个。 每根头发表面 （长约10cm ）平均分布细菌141 个。 每毫升唾液平均分布细菌67400 个。 以下是拍摄的部分照片： 3 讨论 从实验结果可以看出，实验室环境及人体体表微生物种类多样， 数量普遍较多。学校越来越重视对学生实践能力的培养，学生在实验 室的时间和机会越来越多。实验室中微生物虽然危害程度较低，但缺 乏基本的防 意识，大量接触也会有感染的危险。有必要让广大同学 了解并非所有的微生物都是有害的，对有害微生物加强防 意识，对 实验中富集的微生物采取灭菌处理，做到微生物实验室安全管理工作 标准化和规 化，同时加强学生对微生物实验无菌操作的认