AccQ_Tag法应用技巧.pdf

氨基酸和生物资源 Amino Acids Biotic Resources 2001 ,23 (4) :47～49 ·47 · Accq. Tag 法应用技巧 陈永波 　　　　　　　　饶 　斌 　　覃 　兰 ( ) ( ) 湖北恩施南方马铃薯研究中心 　445000 　 中日合资湖北峰江氨基酸有限公司 　445800 摘要 :Accq. Tag 法是 Waters 公司于 1994 年推出的氨基酸测定方法 , 由于它具有衍生步骤简单,操作方便、生成的 衍生物稳定等特点而得到广泛应用 ,本文介绍一些改善峰组分离度、定量计算及节约衍生剂用量等方面的技巧 , 以使 用户得到最佳的分析结果与降低分析成本。 关键词 :Accq. Tag 法 ;应用技巧 ( ) 中图分类号:Q503 　　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 :1006 - 8376 2001 04 - 0047 - 03 　　Accq. Tag 法是目前最为优秀的氨基酸测 以标准溶液的摩尔浓度为梯度做标准曲线 ( 对未知样品进行定量 ,是一般分析测试工作中 定方法 ,Waters Accq. Tag Fluor 衍生剂 AQC , 即6氨基喹啉基N羟基琥珀酰亚氨基酸基甲 的常规方法 , 即先将标样稀释成一定的浓度梯 ) ( μ ) 酸酯 能与所有含氨基的化合物发生快速、定量 度 如 0. 10 、0. 20 、0. 30 、0. 40 、0. 50 mol/ ml , ( μ μ) 反应 ,过量的 AQC 可在 1 min 内水解为不干扰 衍生后分别进相同的体积 如 8 l 或 10 l ,如 测定的 AMQ ,生成的衍生物稳定 ,可在 2690 分 此得到的未知样品的结果是摩尔浓度 ,这样做 离单元、510 泵、515 泵、626 泵等溶剂输送系统 的好处是可以非常直接地计算。但在试验中我 组成的不同液相色谱系统上采用 Accq. Tag 专 们发现 ,在色谱中也可以采用以标样的不同进 用柱、Pico. Tag 专用柱或其它性能较好的 C18 样体积制作标准曲线进行定量 ,具体作法是 :衍 μ 柱分离 ,用萤光检测器或紫外检测器检测。该 生一个 0. 50 mol/ ml 的标样 ,分别进不同体积 μ 法适应于氨基酸注射液、口服液及各种水解氨 的样品 ,如 1. 0 , 2. 5 , 7. 5 , 10 l ,制成标准曲 ( 基酸样品的分析 , 从 Milford 实验室的应用报 线 ,这样的结果是几乎所有成分 包括 AMQ 和 告给出了Accq. Tag 法衍生的 59 种氨基化合物 N H3) 都具有非常好的相关性。在本实验室中 ,