第二章--工具酶.pdf

基因工程 第二章 基因工程工具酶和载 体 湖南师范大学生命科学学院 袁婺洲 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 本章目录 •2.1 工具酶 •2.2 克隆载体 •2.3 表达载体 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 第一节 工具酶 • 限制性核酸内切酶 • DNA连接酶 • DNA聚合酶 • 碱性磷酸酶 • 末端转移酶 • 其他工具酶 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 一、限制性核酸内切酶 识别双链DNA分子中的特定序列，并切割DNA双 链 • 1968年，Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出 Hind II和Hind III 主要存在于原核细菌中，细菌的限制与修饰作用，帮助 细菌限制外来DNA的入侵 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 限制性核酸内切酶的命名 属名 种名 株名 H i n d III Haemophilus influenzae d 嗜血流感杆菌d株 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 限制性核酸内切酶的分类 基因工程 特性 I型 II型 III型 核酸内切酶和甲 限制和修饰活性 双功能的酶 双功能的酶 基化酶分开 酶蛋白分子组成 3种不同的亚基 单一亚基 两种不同的亚基 限制作用所需的辅助 2+ 2+ 2+ ATP、Mg