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分子生物学思考题.doc

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分子生物学考试重点(前四章+第七、八章) 第一章 一、DNA重组技术和基因工程技术 (p12) 答:DNA重组技术:将不同的DNA片段,按照人们的设计定向连接起来,于特定的受体细胞中和载体一起复制并得到表达,产生影响受体的新的遗传性状的技术。 基因工程技术:除DNA重组技术外还包括其他对生物细胞基因组结构进行改造的体系。 关键:工具酶的发现和应用 前景:1、合成正常细胞中含量很低的多肽 2、定向改造基因组结构 3、进行基础研究 二、请简述现代分子生物学的研究内容。(第二版前言、p12标题) 答:分子生物学:研究核酸等生物大分子的功能、形态、结构特征的重要性和规律性的科学,主要关心的是核酸在细胞生命过程中的作用,包括核酸的复制和保存、基因的表达和调控。 研究内容:DNA重组技术,基因的调控和表达,生物大分子的功能结构——结构分子生物学,基因组、功能基因组和生物信息学。 第二章 一、核小体(P27) 答:核小体:由H2A、H2B、H3、H4各两分子组成的八聚体和约200bp的DNA组成。八聚体在内,DNA盘绕在外。其是DNA压缩的第一步。若用核酸酶降解核小体,只能得到约146bp的核心颗粒。(另:H1在核小体的外面) 核心颗粒:除去接头DNA的核小体单体,长度约146bp 核小体单体:八聚体+200bpDNA组成,包括接头DNA 二、DNA的半保留复制(p38) 答:DNA在复制过程中,碱基间的氢键首先断裂,双螺旋解旋解链,每条单链分别作为模板合成新链。新生成的DNA分子与原DNA分子的碱基顺序完全一样,这样每个子代分子的DNA一条单链来自模板链,另一条单链来自新合成的链,这种复制方式成为DNA的半保留复制。 三、转座子(p57) 答:转座子是存在于DNA上的可以自主复制和移动的基本单位,其可以分为两大类:插入序列和复合型转座子,另外还有TnA家族。 四、DNA的一、二、三级结构特征。(P32~p37) 答:1、各级结构的定义: DNA的一级结构:指四种核苷酸的连接和排列顺序 DNA的二级结构:指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构 DNA的三级结构:在DNA双螺旋基础上进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。 2、各级结构的特点: DNA一级结构:(1)、DNA分子是由两条脱氧核苷酸长链盘绕而形成的。 (2)、脱氧核糖和磷酸交替连接,在外侧形成骨架;碱基排列在内侧。 (3)、碱基之间按照互补配对的原则以氢键连接(A=T、C≡G)。 DNA二级结构:(1)、右手螺旋(A-DNA、B-DNA) ①、双螺旋之间有凹槽,小沟1.2(nm)大沟2.2(nm) ②、碱基之间以氢键连接,碱基平面与纵轴垂直,螺旋的轴心穿过氢键的中点 ③、碱基平面距离0.34nm,双螺旋直径2.0nm,每十个核苷酸为一个结构重复周期。 (2)、左手螺旋(Z-DNA)是右手螺旋结构模型的一个补充和发展 DNA三级结构:(1)、超螺旋是其三级结构的主要形式,分为正超螺旋与负超螺旋。在不同的拓扑异构酶的作用下可以相互转变。 (2)、DNA分子的变化满足公式:L=T+W(连接数=旋转数+超螺旋数) (3)、双螺旋DNA的松开导致负超螺旋、拧紧导致正超螺旋。 五、DNA复制通常采取哪些方式?(p40) 答:(1)线性DNA双链复制:①,复制叉方向:单一起点单向、双向,或多起点双向 ②,特殊机制:I,线性的复制子形成环状或多聚分子 II,末端形成发卡结构 III,特殊蛋白介入,在真正末端启动复制 (2)环状DNA双链复制:θ型、滚环型、D-环型 六、真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控?(p51) 答:真核细胞生活周期:G1期:复制预备期、S期:复制期、G2期:有丝分裂预备期、M期:有丝分裂期。 调控方式:(1)、细胞生活周期水平调控:决定是否从G1期进入S期 (2)、染色体水平调控:决定不同染色体或者同一染色体的不同部位的复制子按一定顺序在S周期进行复制 (3)、复制子水平调控:决定复制子是否进行复制 七、DNA 修复包括哪几种?p51~p55 答:1、错配修复:通过复制前母链甲基化来识别错配的子链,根据“保留母链,修复子链”的原则,通过两种方式(3′端、5′端)剪切和合成新链修复。 2、切除修复: (1)、碱基切除修: 1、糖苷水解酶:水解受损核苷酸上的N―β―糖苷键,形成去碱基位点(即AP位点) 2、AP核
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