免疫组化及特殊染色图文.ppt
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免疫组化及特殊染色.ppt
第30页，讲稿共78页，2023年5月2日，星期三FujitaHealthUniversitySchoolofMedicineMitochondoriaApicalmembraneBasolateralmembranePlasmaMembrane+PER?GolgiPlasmamembranePER+GolgiGolgiapparatusEndocrinegranuleEndocrinegranuleLysosomeCytosolNucleusCytoskeletonamylaselysozomePAcPS-100NSEprefixationdiffusionartifactCEAEMAALP
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免疫组化及特殊染色.ppt
第30页，共78页，星期日，2025年，2月5日FujitaHealthUniversitySchoolofMedicineMitochondoriaApicalmembraneBasolateralmembranePlasmaMembrane+PER?GolgiPlasmamembranePER+GolgiGolgiapparatusEndocrinegranuleEndocrinegranuleLysosomeCytosolNucleusCytoskeletonamylaselysozomePAcPS-100NSEprefixationdiffusionartifactCEAEMAALPC
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免疫组化染色体会.docx
本次染色出现问题:
（1） 操作时间过长到时干片时间长，滴加抗体时覆盖不完全，用枪头辅助覆盖不可在切片区操作，否则切片会出现划痕；
（2） 载玻片的背景较脏，操作前需烤箱脱蜡（45度15min）；浸泡的液体如果放置时间过长，需重新配置；
（3） PAS染色失败，分析原因可能如下：1）加入高碘酸溶液前放置在PBS中，未
用蒸馏水泡洗；2）高碘酸溶液氧化时间可适当延长，本次染色用了10min；3）使用雪夫试剂事未提前半小时在室温下放置，且染色结束后流动自来水冲洗时可能水流过大，下次操作时应把水流调小。
（4） 中性树胶封片时气泡较多，且应等其凝固较完全时才观察。
（来自网上）
严格意义上来说，盖玻
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免疫组化染色技术.pptx
掌握免疫组化技术旳概念、原理、优点、ABC染色旳基本操作，了解免疫组化染色技术旳其他几种措施及临床应用。
;主要讲述旳内容;免疫组织化学又称免疫细胞化学，其主要原理是用
荧光素、生物素或地高辛等标识旳抗体（或抗原）对细
胞或组织内旳相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定
量检测，经过组织化学旳呈色反应之后，用显微镜、荧
光显微镜或电子显微镜观察。但凡能作抗原、半抗原旳
物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可应用相应旳特异性抗体，将其用免疫细胞化学手段检出，并研究。;1.高度旳特异性
抗原抗体反应是特异性最强旳反应之一，免疫细
胞化学所用旳抗体必须是特异性强旳多价或单
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免疫组化双重染色技术.ppt
* 第八章. 免疫组化双重染色技术 (Double staining technology in immunohistochemistry) 用免疫组化方法在同一张组织切片上同时显示两种或两种以上的抗原, 以发现其定位, 形态和功能上的相互关系. 一. 连续切片双重染色法 A. 最简单最可靠. 用同样的免疫组化方法, 在两张相邻切片上各显示一种抗原, 然后比较. 由于每张切片上只进行一次染色, 所以不会互相干扰或出现假性双标记. B. 切片厚度1~3?m. 如果较厚如神经组织切片(10~20?m), 可以采用“镜像”法, 即相邻切片翻转后贴在载玻片上, 或利用软件PS. 二. 免疫
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免疫组化染色技术培训.ppt
主要讲述的内容;免疫组织化学又称免疫细胞化学，其主要原理是用
荧光素、生物素或地高辛等标记的抗体（或抗原）对细
胞或组织内的相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定
量检测，经过组织化学的呈色反应之后，用显微镜、荧
光显微镜或电子显微镜观察。凡是能作抗原、半抗原的
物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可应用相应的特异性抗体，将其用免疫细胞化学手段检出，并研究。;1.高度的特异性
抗原抗体反应是特异性最强的反应之一，免疫细
胞化学所用的抗体必须是特异性强的多价或单价抗体，
具有高度的认别能力，在抗原识别上可达到单个氨基
酸的水平，这是其它组织化学方法难以相比的。;2.敏
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影响免疫组化染色的因素及对策.ppt
影响免疫组化染色的因素及对策良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。一、影响免疫组化染色质量的因素标本的固定手术标本的及时固定是保证免疫组化染色质量的关键。未能及时固定的组织，会造成细胞的变性和自溶，导致结构的破坏和抗原物质的弥散，在免疫组化染色上表现为抗原定位的变化和背景染色的增高。过度的固定会造成抗原决定簇的封闭和抗原的丢失。同一病例的ER表达情况E
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HEMassonVGpas免疫组化TUNEL染色步骤.doc
石蜡切片的制作
包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内，包埋成块，使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却，这个程序称为包埋。包埋剂凝固后，进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。 一．石蜡包埋法 石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法，它有许多优点，操作简易便于掌握，可进行连续切片，包埋后的组织可以长期保存。 包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。手工包埋的步骤如下： 1.组织浸入石蜡后，包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上，其下点燃酒精灯，以保持石蜡的溶解状态。 2.准备好包埋框，
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影响免疫组化染色的因素及对策.ppt
感谢大家观看第32页,共32页，2024年2月25日，星期天关于影响免疫组化染色的因素及对策良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。第2页,共32页，2024年2月25日，星期天一、影响免疫组化染色质量的因素1、标本的固定手术标本的及时固定是保证免疫组化染色质量的关键。未能及时固定的组织，会造成细胞的变性和自溶，导致结构的破坏和抗原物质的弥散，在免疫组化
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组化及免疫组化染色结果的定量测定.ppt
第十四章. 组化和免疫组化染色结果的定量测定
(The Quantitation Assay of Histochemistry Immunohistochemistry Staining)
将组化, 免疫组化和原位杂交等的染色结果分析提高到定量水平. 最常用的有图像分析术(Image analysis technique), 显微分光光度术(Microspectrophotometry technique), 流式细胞术, (Technique of flow cytometry, FCM)和 激光扫描共聚焦显微镜术(Technique of laser scan
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免疫组化4免疫组化.ppt
特点：敏感性较直接法高，一 种标记抗体能用于相应 动物制备的多种特异性 抗体，检测多种抗原。 但较直接法费时，非特 异染色稍重。 第四节 酶 抗 酶 法 ● 制备抗酶抗体 ● 制备PAP复合物 酶桥法 组织抗原 第一抗体 第二抗体 第三抗体（抗酶抗体） HRP 一、PAP法 原理：抗原---特异性抗体---第 二抗体（桥抗体）--- PAP复合物 步骤：三步法 组织抗原 第一抗原 第二抗体 PAP复合物 PAP法
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免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策.doc
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片和“杂音”染色片。
一、无色片
染色结束后，切片中见不到任何阳性信号。这是常规工作中比较常见的现象，出现这种现象，有两种可能：1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细
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免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析与对策.pdf
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。 由于免疫组化染色过程中存在
很多步骤或环节， 每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果， 因此， 要做好一张高质
量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。 需要病理技术员和病理医生密切配合、 相互协
调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。 虽
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即用型大鼠VEGFSP免疫组化染色试剂盒.DOC
即用型大鼠VEGF SP免疫组化染色试剂盒
产品编号：QD82178
试剂的保存：短期于4℃保存，长期于-20℃保存。
工作原理
血管内皮生长因子 (VEGF)是相对分子质量为(34～45) ×103的同源二聚体糖蛋白。人体内可形成多种异构体可以特异性地促进血管内皮有丝分裂的因子。VEGF是一种选择性促内皮细胞有丝分裂原,它能增加血管通透能力,促进内皮细胞增殖,对肿瘤的浸润和转移有重要影响。
链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质，分子量47000。同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍。亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链
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免疫组化非特异性染色的消除方法.doc
免疫组化非特异性染色的消除方法 作者：佚名????实验频道来源：本站原创????点击数： 1083????更新时间：2004-12-21 【我要评论】 【字体：小 大】
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： （1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去 。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 （3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。 （4）从组织中难于提纯