NYT 1156.14-2008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1156.14—2008杀菌剂农药室内生物测定试验准则盆栽法第14部分：防治瓜类炭疽病试验Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 14: Potted plant test for fungicide control anthracnose [Colletotrichumorbiculare (Berk.Mont.) Arxl on cucurbits2008-05-16 发布2008-07-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1156. 14--2008前言《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标准：第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法；第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验‧平皿法；--第 3部分：抑制黄瓜霜霉菌病菌试验平Ⅲ叶片法;-第 4 部分：防治小麦白粉病试验，盆栽法;第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验蚕豆叶片法;-第6部分：混配的联合作用测定；-第7部分:防治黄瓜霜霉病试验盆栽法；第8部分:防治水稻稻瘟病试验盆栽法；第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法；-第10 部分：防治灰霉病试验‧盆栽法;第11部分：防治瓜类白粉病试验盆栽法;一第 12 部分:防治晚疫病试验盆栽法;第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法；第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；第15部分：防治麦类叶锈病试验盆栽法;第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；鲁本部分是《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》的第14部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：袁善奎、朱春雨、徐文平、吴新平、张薇、杨峻。1 NY/T 1156. 14—2008农药室内生物测定试验准则杀菌剂盆栽法第14部分：防治瓜类炭疽病试验1范围本部分规定了盆栽法测定杀菌剂防治炭疽病的试验方法。本部分适用于农药登记用杀菌剂对瓜类作物炭疽病菌的室内生物活性测定试验。2．仪器设备普通实验室常规仪器设备。2.1电子天平(感量0.1 mg)。2.2喷雾器械。2.3人工气候箱。2.4移液管或移液器等。3 试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯;水为蒸馏水。3.1生物试材供试病菌为野生敏感型瓜类炭疽病菌 Colletotrichum orbiculare（Berk.Mont.）Arx菌株。记录菌种来源。供试作物为感灰霉病品种，盆栽、培养至2片～4片真叶期，编号备用。3. 2 试验药剂原药(或母药）。3.3 对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药(或母药），其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4 试验步骤4.1孢子悬浮液制备将试验用病原菌在适宜的培养基上培养,待产生孢子后，用无菌水洗下孢子,并用 2 层～4 层纱布过滤，制成浓度为1×105 个孢子/mL的悬浮液，备用。4.2药剂配制水溶性药剂直接用蒸馏水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂（甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等)溶解,用 0.1%的吐温-80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根据药剂活性,设置5个～7个系列质量浓度,有机溶剂最终含量一般不超过0.5%～1%。制剂可以直接用水稀释。4.3药剂处理将药液均匀喷施于叶面至全部润湿，待药液自然风干后备用。每处理3盆，4次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分及水的对照处理。4.4接种与培养1 NY/T 1156. 14—2008用微量取样器吸取10ul孢子悬浮液接种于叶片正面，每处理不少于 30个接种点。保护性试验在药剂处理后 24 h 接种;治疗性试验在药剂处理前 24 h 接种。抗病激活性试验于药剂处理3 d～7 d 后再接种。接种后移至保湿箱中（相对湿度 95%～100%）黑暗培养 24h，然后在22℃～27℃、光照强度20000Lux、湿度80%～90%的条件下培养。4.5调查空白对照发病率达到50%以上时，用游标卡尺以十字交叉垂直法测量病斑直径各一次，取平均值，单位为毫米（mm）。5数据统计及分析5.1 计算方法根据调查数据,按公式(1)计算防治效果，以百分率(%)表示，计算结果保留小数点后两位。P= Do_Di ×100.... (1)Do式中：P—一防治效果,单位为百分数(%);D。一空白对照病斑直径，单位为毫米(mm);D1-药剂处理病斑直径，单位为毫米（mm）。5.2统计分析用 DPS(数据处理系统)、SAS(统计分析系统)或 SPSS(社会科学统计程序)等标准统计软件对药剂浓度对数值与防效几率值进行回归分析，计算各药剂的EC5o、ECo等值及其95%置信限，并进行各药剂处理间的差异显著性分析。6结果与报告编写根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告。2 80000